Лада 10 модель: Lada 2110 (2111,21112) — обзор, цены, видео, технические характеристики

Содержание

ВАЗ-2110: от 1 до 800 000 — Новости

12 ноября с главного конвейера Волжского автозавода сошел 800-тысячный автомобиль семейства »2110». Прошедшее в рабочем порядке, это событие практически совпало с началом производства здесь обновленной »десятки» — ВАЗ-2110Т.

Появление в 1995 году на главном конвейере АВТОВАЗа качественно новых для отечественного автомобилестроения моделей, каковыми стало семейство »2110», оказалось знаковым. В сложной экономической ситуации Волжский автозавод взялся за реализацию большого проекта, подтвердив тем самым свою способность работать на перспективу в любых условиях. Освоив в течение 5 лет проектные мощности по выпуску 220 тысяч автомобилей семейства »2110» в год, АВТОВАЗ заметно улучшил и их потребительские свойства. Все нынешние ВАЗ-2110, ВАЗ-2111, ВАЗ-2112 и их модификации оснащаются современными 8-ми и 16-клапанными двигателями с электронными системами управления. Именно на этих моделях впервые среди отечественных автомобилей вошли в серийные комплектации иммобилизаторы, электростеклоподъемники, электроуправляемые зеркала, подогрев передних сидений. В 2001 году на главном конвейере началась установка кондиционеров в автомобили семейства »2110».

Появившиеся на главном конвейере почти одновременно с 800-тысячной »десяткой» первые ВАЗ-2110Т получили новые, более современные детали экстерьера и интерьера. А в опытно-промышленное производство, где отрабатывалась технология выпуска этой модели, приходит уже модернизированная ВАЗ-2110М — значительно обновленный по внешнему виду автомобиль.

Отмечая отменную популярность »десяток» на отечественном и многих зарубежных рынках, а также значительный потенциал этих автомобилей, вазовские специалисты продолжают работу над усовершенствованием всего семейства. Весной этого года на традиционных встречах с журналистами АВТОВАЗ представил опытные образцы »десяток» с гидро- и электроусилителями рулевого управления, автоматическими трансмиссиями, антиблокировочной системой тормозов, интерфейсной системой управления электрооборудованием.

Получая современное, соответствующее мировым стандартам оснащение, автомобили семейства »2110» по-прежнему остаются одними из наиболее доступных на автомобильных рынках в России и за ее пределами. Это же в полной мере относится и к обслуживанию »десяток». Развитая система фирменного вазовского сервиса, постоянное наличие сертифицированных запасных частей в сочетании с доступной стоимостью делают автомобили семейства »2110» абсолютными лидерами продаж на отечественном автомобильном рынке.

в гараже нашли ВАЗ-21106 «Желтую акулу» — Российская газета

Автомобильный видеоблогер Roma Urraco опубликовал фотографии ВАЗ-21106 «Жёлтая акула». Спортивный седан со скромным пробегом в 883 километра хранится в гараже под слоем пыли, пребывает в отличном состоянии, за исключением разбитой фары и смещённой решётки радиатора.

Прототип ВАЗ-21106 дебютировал на Московском автосалоне в 1996 году и получил имя «Жёлтая акула». Модель создавалась для омологации гоночного автомобиля в соответствии с международным регламентом, она успешно участвовала в российских соревнованиях.

От обычной -2110 «заряженная» версия отличается двухцветной окраской кузова, аэродинамическим пластиковым обвесом с раздутыми арками, иной решёткой радиатора, а также установленными 15-дюймовыми «сликами» с низкопрофильной резиной, воздухозаборником на капоте, другими боковыми зеркалами, спойлером на крышке багажника, лючком бензобака в стиле раллийных машин и молдингами дверей. Салон имеет иной щиток приборов, спортивное рулевое колесо с гидроусилителем ZF, «ковшы» с подогревом, кожаную отделку, чёрный потолок и электростеклоподъемники.

По технике «сто шестая» получила заниженный до 170 мм клиренс, увеличенную колёсную базу, расширенную на 76 мм колею, прогрессивные треугольные рычаги, переднюю подвеску с дополнительным стабилизатором, модернизированные тормоза. Передние тормоза дисковые, задние тормоза барабанные. За доплату предлагались задние дисковые тормоза.

На жёлтом прототипе, созданном в единственном экземпляре, стоял форсированный 1,5-литровый двигатель на специальном подрамнике. Позже на -21106 начали устанавливать двухлитровый «опелевский» мотор -C20XE мощностью 150 л.с. и максимальным крутящим моментом 198 Нм при 4800 об/мин. Иностранный «атмосферник» работал в паре с пятиступенчатой механической коробкой передач Opel. Первую «сотню» седан набирал за 9.5 секунд, максимальная скорость составляла 205 км/час, масса равняется 1100 кг. Также автомобиль оснащался более скромной версией агрегата Opel Ecotec X20XEV мощностью 136 л.с.

Выпуском ВАЗ-21106 занимались дочерние предприятия АвтоВАЗа, тольяттинские фирмы «Моторика» и «Лада-Тул». Всего было изготовлено около 300 седанов ВАЗ-21106 и 18 экземпляров двухдверного купе ВАЗ-211061. Производство кузовов для «сто шестой» завершилось в 1998 году, но сборка комплектных образцов продолжалась вплоть до 2009 года. Цена на спортивную четырёхдверку равнялась примерно двум новым ВАЗ-2110.

Напомним, в начале 2019 года стартовали продажи Lada Vesta Sport. Под капотом модели располагается 1,8-литровый двигатель, мощностью 145 л.с. и крутящим моментом 187 Нм. Мотор работает в связке с пятиступенчатой «механикой» JR5. Максимальная скорость составляет 198 км/ч, время разгона от 0 до 100 км/ч — 9,6 секунды. В шасси применены новые амортизаторы и стойки, тормоза с дисками увеличенного диаметра, заниженная подвеска с дорожным просветом в 162 мм.

По экстерьеру «заряженная» Lada Vesta получил спортивный обвес, расширенную колею с передними пластиковыми крыльями, оригинальные 17-дюймовые диски на пяти болтах, спойлер на крышке багажника и антенну «акулий плавник». В интерьере появились новые сиденья с развитой боковой поддержкой, обновленная комбинация приборов, черный потолок, атмосферная LED-подсветка, декоративные элементы под «карбон», накладки на педалях и порогах. Рулевое колесо, рукоятка коробки передач, ручник и подлокотник отделаны кожей.

Масло для ВАЗ 2110 – какое масло заливать в двигатель и коробку?

Переднеприводный седан ВАЗ 2110 разрабатывался Волжским автозаводом с 1980-х годов и был запущен в серийное производство в 1996 году. В 1998 году начат выпуск универсалов семейства Lada 110 с индексом 2111, в 1999 – 5-дверных хэтчбеков ВАЗ 2112. Кроме них с 2002 года малыми сериями собирался 3-х дверный хэтчбек ВАЗ 21123 (Lada 112 Coupe). Модели комплектовались бензиновыми двигателями объемом 1.5 и 1.6 литра, карбюраторными на 72 л. с. (до 2000 года) или с распределенным впрыском, 8- и 16-клапанными, мощностью 77 – 93 л. с., и 5-ступенчатыми механическими коробками передач. Также небольшими партиями были выпущены автомобили с моторами 21128 (1.8 л, 100 л. с.), 21106 (двигатель Opel C20XE, 2.0 л, 150 л. с.) и роторно-поршневыми двигателями. В 2007 – 2009 годах модели 2110 – 2012 постепенно были заменены АвтоВАЗом на обновленное семейство Lada Priora, однако в дальнейшем выпускались по лицензии предприятиями на Украине и в Египте. Какое масло заливать в двигатель ВАЗ 2110 зависит от условий использования автомобиля.

TOTAL QUARTZ 9000 5W40

Произведенное по синтетической технологии моторное масло TOTAL QUARTZ 9000 5W40 подходит для всесезонной эксплуатации в тяжелых условиях, таких как городская езда с частыми разгонами и остановками или спортивное вождение. Оно обеспечивает надежную защиту деталей двигателя от износа и, благодаря специальным присадкам, препятствует образованию на них отложений. Антиокислительные свойства TOTAL QUARTZ 9000 5W40 гарантируют стабильность его характеристик даже при больших пробегах между заменами масла в ВАЗ 2110. Текучесть масла при низких температурах облегчает холодный запуск мотора и гарантирует смазывание его элементов сразу после пуска. TOTAL QUARTZ 9000 5W40 соответствует спецификациям ACEA A3/B4 и API SN/CF и рекомендуется компанией TOTAL как универсальное моторное масло для ВАЗ 2110.

TOTAL QUARTZ 9000 5W40

TOTAL QUARTZ 7000 10W40

В качестве масла для ВАЗ 2110 старших поколений целесообразно использовать TOTAL QUARTZ 7000 10W40 – это моторное масло на синтетической основе, отвечающее стандартам ACEA A3/B4 и API SN/CF предохраняет двигатель от износа при его работе в режиме высоких нагрузок и, за счет улучшенных диспергирующих свойств, сохраняет его в чистоте. Высокая вязкость масла гарантирует особенно высокую стойкость к окислению. TOTAL QUARTZ 7000 10W40 подходит для автомобилей линейки Lada 110 с 8- и 16-клапанными двигателями.

TOTAL QUARTZ 7000 10W40

Трансмиссионное масло для автомобилей ВАЗ 2110

В коробках передач ВАЗ 2110, для которых требуются трансмиссионные масла с уровнем свойств API GL-4, TOTAL рекомендует применять TRANSMISSION DUAL 9 FE 75W90 (в автомобилях до 2000 г.в.) и TRANSMISSION GEAR 8 75W80 (с 2000 г.в.). Эти масла обладают отличными смазывающими и антикоррозионными свойствами, поэтому обеспечивают длительный срок службы КПП. Кроме того, TRANSMISSION DUAL 9 FE 75W90 за счет технологии FUEL ECONOMY (FE) позволяет сократить расход топлива, по сравнению со стандартными смазочными материалами.

TOTAL TRANSMISSION DUAL 9 FE 75W90

TOTAL TRANSMISSION GEAR 8 75W80

Узнайте подробнее о моторных и трансмиссионных маслах TOTAL.

10 необычных моделей Lada, которые не пошли в серию :: Autonews

Недавно в сети рассекретили внешность обновленной Lada Niva. Шпионские изображения прототипа нового внедорожника, который стал очень похож на Toyota RAV4, появились в социальных сетях. Сам АвтоВАЗ отказался как-либо комментировать утекшие в фотографии, однако источник Autonews.ru, знакомый с ходом работы над проектом, подтвердил подлинность запечатленной машины. При это он отметил, что это пока еще не окончательно утвержденный вариант внешности, который получит автомобиль. И пока в сети не утихают споры о дизайне новой «Нивы», мы решили вспомнить самые знаковые концепты и прототипы АвтоВАЗа, которые, увы, так и не стали серийными.

Проект Х

Экспериментальные модели ВАЗа всегда отличались невероятными техническими решениями. Чего только стоила роторная «копейка» или полностью электрическая версия универсала 2102. Однако с точки зрения дизайна автомобили отечественного автогиганат мало чем удивляли. Так было до тех пор, пока в середине 1980-х не был создан концепт, загадочно названный буквой «Х».

Малоизвестный проект представлял собой размышления на тему автомобиля 2000 года. В качестве такого вазовцы видели семейный семиместный однообъемник сравнительно компактного размера с аэродинамичным кузовом и оригинальным ветровым стеклом. Причем помимо пятидверного автомобиля к выпуску планировался и укороченный трехдверный вариант. А строить эти машины планировали на базе серийного ВАЗ-2108 с его агрегатами. Был создан лишь один макет в натуральную величину и две модели в масштабе 1:5. Проект был отложен, а к началу 1990-х заводу уже было не до экспериментов. 

Рапан

К концу 1990-х годов, когда положение завода все еще было сложным, но уже не столь катастрофичным, на АвтоВАЗе вновь вернулись к постройке экспериментальных машин и прототипов. В тот период мода на биодизайн с его округлыми формами уже начала сходить на нет, но вазовский концепт «Рапан» все равно произвел фурор на Парижском автосалоне 1998 года.

Сложносочиненные линии кузова, большая площадь остекления и сдвижные двери по-настоящему удивляли. Внутри у автомобиля был совершенно ровный пол, а кресла поворачивались вокруг оси. Удивлял и руль с фиксированной центральной частью и встроенными приборами. Но главное, что «Рапан» был электрокаром! Агрегаты и батарея были заимствованы у экспериментальной электрической модификации «Оки». Но заводчанам такая проработка не помогла. На тот момент предприятие так и не нашло инвесторов на осуществление смелого проекта. А прототип, созданный в единственном экземпляре, так и остался в музее завода.

Родстер

В период, когда на ВАЗе создавался этот стильный концепт, свет увидели Audi TT первого поколения, Porsche Boxter и еще несколько знаковых спортивных моделей эпохи миллениума. Поэтому неудивительно, что тольяттинский дизайнер Николай Нужный, стажировавшийся в итальянском ателье Sbarro, для нового прототипа Lada выбрал именно кузов родстер. Машина удивляла и тем, что была сделана в эпоху серьезных финансовых проблем автогиганта и будто создавалась наперекор всем невзгодам.

В основу автомобиля легло укороченное шасси «Калины», а двигатель под капотом стоял с увеличенным рабочим объемом — двухлитровый. По словам разработчиков, максимальная скорость достигала 200 км/ч, а первую «сотню» спортивная Lada разменивала за 9 секунд. Родстера был оснащен складной крышей, которая управлялась электроприводом и в сложенном виде не отнимала полезный объем багажника. Несмотря на детальную проработку кузова и салона, машина так и осталась в единственном экземпляре.

Новая классика

ВАЗовская классика стала одним из рекордсменов по длительности конвейерной жизни не только в нашей стране, но и в мире. Однако этот срок мог оказаться не предельным. На АвтоВАЗе вынашивали план продления конвейерной жизнь классического семейства. Именно с этой целью был создан проект ВАЗ-2151, также известный под именем Lada Classic. Машина представлял собой концептуальный универсал на шасси ВАЗ-2105 с более современным и трансформируемым салоном. У автомобиля был громадный 500-литровый багажник и складные задние сиденья, а классическое шасси модернизировали с использованием реечного рулевого механизма, передней подвески МакФерсон и мотора объемом 1,7 л от «Нивы». Позже появилась еще одна вариация на ту же тему — проект седана ВАЗ-2107М с именем Classic-2. Но в обоих случаях дело ограничилось лишь выставочными экземплярами, классическая платформа была признана неперспективной для дальнейшего развития.

Ока-2

Микролитражка «Ока», появившаяся еще в далеком 1987 году, к началу нулевых считалась безнадежной устаревшей и непригодной для дальнейшей модернизации. Поэтому на АвтоВАЗе всерьез работали над созданием второго поколения автомобиля. Первый прототип новой «Оки» вазовцы представляли еще в конце 1990-х, но тогда дальше сомнительного дизайнерского макета дело не пошло. Вариант 2003 года имел более товарный вид и обладал куда большими шансами попасть на конвейер. Новый хэтчбек с заводским индексом ВАЗ-1121 получился больше оригинальной «Оки» и строился уже на агрегатах «восьмерки» с четырехцилиндровыми моторами и неплохим набором оборудования. Прототипы были очень близки к серийным машинам, но в 2004 г. году после смерти главного идеолога проекта гендиректора ВАЗа Виктора Полякова от производства отказались в пользу семейства «Калина».

Проект С

Проект C был самой важной и долгоиграющей разработкой АвтоВАЗа в начале двухтысячных. В 2005 году после прихода на завод менеджеров из «Ростехнологий» в Тольятти решили создать абсолютно новую платформу для целого семейства автомобилей, включая седан, хэтчбек, универсал, кроссовер и даже спорткар. Однако первым показали седан «Силуэт» (ВАЗ-2116), который не только шагнул в D-класс, где продукция АвтоВАЗа никогда не выступала ранее, но и продемонстрировал новый дизайнерский стиль марки, саму платформу с иным шасси и двигателями объемом 1,8 л (116 и 122 л.с.), а также новую коробку передач. Впрочем, войти в новый класс с собственной разработкой АвтоВАЗу так и не было суждено. Через несколько лет проект перспективной платформы был окончательно свернут из-за разразившегося экономического кризиса и нового формата партнерства с альянсом Renault-Nissan.

Lada C-concept и C-Cross

Эти два прототипа, по сути, были продолжением проекта С, который так и не стал серийным. И, пожалуй, C-concept был одним из самых ярких концепт-каров, созданных на АвтоВАЗе до прихода Стива Маттина. Спортивная трехдверка, увидевшая свет в 2007 году, по дизайну превзошла даже самых передовых европейский машин этого класса. И это не голословное утверждение, а реакция публики на Женевском автосалоне, где был представлен автомобиль. Машина была построена на новой платформе, созданной в рамках проекта С и получила перспективный 2,0-литровый мотор, сочетающийся с механикой. По расчетам разработчиков разгон до «сотни» должен был укладываться в 8 с, а «максималка» переваливала за 210 км/ч.

Год спустя после дебюта C-concept в Москве представили прототип городского кроссовера Lada C-Cross с индексом ВАЗ-2119, который также базировался на новом шасси и демонстрировал яркий спортивный стиль. Но ни одна из машин в рамках проекта С так и не стала серийной, поскольку работа над платформой была свернута. Впрочем, некоторые наработки проекта С впоследствии были использованы в работе над семейством Lada Vesta.

Отзывы владельцев Лада 2110 (Lada 2110)

ГлавнаяОтзывыЛада2110


3.7 (отзывов: 99) *

Воспользуйтесь Фильтром «год выпуска», чтобы сделать выборку отзывов о Лада 2110 конкретного года.

Сортировка: —по умолчанию—от больших к меньшимот меньших к большимот свежих к старымот старых к свежимот лучших к худшимот худших к лучшим

7

Машину приобретал 3 года назад в примерно таком же состоянии. На момент приобретения счетчик был скручен и показывал всего 1000 км. пробега. В настоящий…

1 Сейчас у меня Митсубиси Аутлендер, 2 литра двигатель 150 л. с., масса авто 1500 кг, так вот по сравнению с Ладой 2110 (эксплуатировал только 16 клапанные 124 моторы ВАЗ) — приёмистости ничуть не больше, чем у 2110. Вообще соотношение стоимость содержания/комфорт/сопртивность у иномарок проигрывает ВАЗ 2110. Т.е. если морально готов отдавать 50-60 т. р в год, без стоимости бензина (в эту стоимость я включил затраты на ТО или на запчасти в течении 5 лет эксплуатации плюс потеря в стоимости при продаже), то можно посмотреть на иномарки, а если машина нужна для «работы» — передвижение, привезти груз или рабочих — 2110 это песня. 6

Мой первый автомобиль. Скептически относился к продукции Автоваза, но из-за небольшого бюджета купил эту 10ку в хорошем состоянии. Надежностью приятно…

Приобрёл весной и не мог нарадоваться. На спидометре было уже 80000 пробега. Не смотря на отличное состояние, и неприхотливость, начал всё переделывать под себя. Под капотом поменял много…

ВАЗ 2110 1.6, 16 кл., 2002 г. в. Выбрала автомобиль, честно признаться, по внешним данным — понравился дизайн. Купила в 2005, пробег был 130 тыс. км. Машина — зверь была первые полгода…

Отъездил 3 года на восьмиклапанной Десятке. Брал с пробегом 260 тыс. Из них 180 проехал мой приятель, поэтому брать было не страшно (знал, что за авто и основные поломки). Ремонт мотора…

5 Если говорить о средстве передвижения, то ВАЗ 2110 (да и все модели этой марки) — самый выгодный вариант. Очень дешевое обслуживания и доступность запчастей выносят эту марку на первое место среди самый популярных автомобилей. Конечно, о надежности говорить не приходится, автомобиль действительно может Вас подвести в дороге. И я знаю, что заранее, никто его проверять не будет. Наверно, это один из самых больших минусов сей марки. Впрочем, за свои деньги — не плохая машина. Если поездить…

Здравствуйте! Хочу рассказать о владении автомобилями. В 2000 году решил продать девятку и купить 99, но дочь мне говорит: «Пап, давай купим десятку», а мне, если честно, от одного вида…

7

Нормальный авто. Хорошая печка. Легок в ремонте. Дешев в обслуживании. Ну начнём, ВАЗ 21103. Авто покупался на авторынке, опыта по покупке подержанных…

7 Динамика — 4, управляемость — 4, комфорт — 4, салон — 3, багажник — 5, ТО дешево. В общем авто не плохое, эксплуатация не бьет по карману. Запчасти есть в любом магазине. Малый расход топлива. Я брал 10-ти летнюю машину. Конечно вложился, но теперь машина — пуля. За 2.5 года заменил стартер, генератор, аккумулятор, ну и капиталка двигателя. Достоинства авто: Дешев в обслуге, малый расход топлива. Недостатки: Все-таки ломается. Как авто на каждый день — самое то. 7

ВАЗ 21104, двигатель 1.6, очень динамичная машина, а вместе с короткоходной спорт кулисой, почти спортивная динамика. От светофора уходит в считанные …

3 Машина шустрая. Масло от замены до замены. В салоне стоят чехлы. Подвеска мягкая, если стоят масляные стойки. В салоне зимой очень тепло (печка — просто огонь). Двигатель клапана при обрыве ремня клапана не загибает. Но возить запасной ремень не поможет, трудно менять. Лучше на станции и вовремя. Амортизаторы задние разборные. Передние билштайн меняются патроны и поехал.

Здравствуйте, господа автолюбители. Почитал я достаточно отзывов и решил добавить не отзыв, а историю эксплуатации отечественной машины. Сам я человек деревенский, поэтому болтами и гайками…

Всем привет! Вот вдоволь начитался отзывов о чуде нашего автопрома, и решил рассказать о своей 21102. Купил её в мае 2008 г. Сразу оговорюсь, денег в обрез было (то, что за последний курс…

Она у меня уже 4 года — третий хозяин. Купил ВАЗ 2110, так как у начальника ПТО отобрали права. В любое время автомобиль готов к эксплуатации. Динамика — разгон с 9 секунд до 100. Масло Лукойл синтетика зимой, зато летом Visco натуральное, мотор отдыхает. В минус 46 (как здрасьте) завел и поехал. Хочу взять Паджерик, но эту машину ВАЗ 2110 оставлю у себя.

Загрузить еще

* Средняя оценка расчитана на основании 99 отзывов владельцев Лада 2110, размещенных на сайте.

Добавить свой отзывДобавить объявление

Сейчас в продаже

Москва

Geely Emgrand

2012 г.в. | 56,500 км350,000 р.

Москва

Opel Astra

2010 г.в. | 86,150 км460,000 р.

Москва

Skoda Octavia

2008 г.в. | 95,000 км330,000 р.

Москва

Лада 2101

1985 г.в. | 87,000 км240,000 р.

Москва

Opel Astra

2010 г.в. | 92,000 км420,000 р.

Москва

Volkswagen Jetta

2012 г. в. | 126,000 км470,000 р.

Москва

Toyota Prius

2014 г.в. | 66,000 км650,000 р.

Москва

Opel Astra

2006 г.в. | 132,665 км240,000 р.

Москва

Peugeot 308

2008 г.в. | 177,000 км290,000 р.

Москва

Opel Astra

2008 г.в. | 180,000 км193,284 р.

Сложные роды «антилопы»: история создания ВАЗ-2110

Десятой моделью ВАЗа должен был стать седан на базе Самары, впоследствии ставший "девяносто девятой". На деле же индекс 2110 получил переднеприводник второго поколения – автомобиль без имени собственного, который все знают как "десятку". История рождения десятого семейства столь же непростая, как и времена, в которые оно появилось.

Еще задолго до выхода трехдверного хэтчбека 2108 разработчикам стало ясно, что на смену откровенно устаревшим Жигулям нужен новый седан. Мнения разделились: часть конструкторов придерживалась мнения, что его нужно создавать на новой (переднеприводной) платформе, другие же видели будущую машину на «классической» агрегатной базе. Перспективная модель с задним приводом получила индекс 2112, и над ней с начала восьмидесятых годов активно работало несколько групп дизайнеров и конструкторов.

К моменту запуска «восьмерки» в серийное производство в преимуществах переднего привода уже мало кто сомневался, поэтому к 1985 году проект 2112 закрыли. Параллельно на заводе работали над Спутником с трехобъемным четырехдверным кузовом: макет с индексом 2110 был представлен на худсовет Минавтопрома в июле 1983 года – по сути, внешне эта машина практически повторяла серийный ВАЗ-21099, который пошел в серию аж в 1990 году. «Девяносто девятая» перестала быть ВАЗ-2110 лишь к концу 1985 года, когда её первоначальный индекс «отдали» переднеприводникам второго поколения.

Учитывая стратегический просчет по «восьмому» семейству, на сей раз запускать в серию сначала решили именно востребованный в СССР седан, а не хэтч. Однако работы над универсалом и пятидверным хэтчбеком десятого семейства велись практически одновременно. «Десятку» задумывали именно как семейство, которое впоследствии сможет заменить и «классику», и Спутник.

ВАЗ-2112 внешне чем-то напоминал новейший Audi 100 C3


Работами по новому семейству начали заниматься именно в 1985-м, сразу после закрытия «классического» проекта 2112, но в это время страну стало лихорадить. Перестройка и переход на «хозрасчетные» рельсы экономики привели к тому, что инфраструктура и промышленность (в том числе и автомобильная!) начали потихоньку разрушаться. В 1987 году государство начало урезать или вовсе сокращало финансирование заводов, что в первую очередь било именно по перспективным моделям и запуску новинок. Именно поэтому «в муках» рождалась не только «десятка», но и модели других заводов – новый Москвич, Таврия, Ода…



Поскольку запуск «десятки» в производство все время откладывался из-за банального отсутствия средств, у дизайнеров и конструкторов волей-неволей появлялась возможность доработать автомобиль и «освежить» его с учетом новых веяний. Возможно, поэтому дизайн-проект ВАЗ-2110 был принят лишь с третьего раза. Параллельно с улучшениями внешности меняли и содержание. В частности, благодаря вынужденной паузе к моменту постановки автомобиля на производство на ВАЗе был освоен впрыск топлива, без которого выход на внешние рынки в начале девяностых годов был уже просто невозможен.


Предсерийный ВАЗ-2112


Еще во время разработки нового седана на заднеприводной платформе дизайнеры уделяли много внимания аэродинамике, сглаживая формы для достижения наименьшего коэффициента лобового сопротивления Сх. Уже во время работы над «десяткой» Сх стал своеобразной идеей фикс для дизайнеров, желавших достичь показателя 0,3 всеми возможными способами. Именно поэтому при переходе от нулевой серии прототипов к сотой и особенно к двухсотой машина заметно округлилась – сглаживались переходы и линии, благодаря чему аэродинамика действительно улучшилась.



По сути, именно стремление «зализать» кузов и определило внешность «десятки», которая была лишена каких-либо выступающих элементов. Да и задние арки получились такими не случайно: «прикрыв» ими колесную нишу, дизайнерам удалось заметно улучшить распределение воздушных потоков (на макетах заднее колесо вообще прикрывал специальный щиток!). Правда, при этом силуэт получился довольно своеобразным, если не сказать тяжеловатым. Именно поэтому острословы впоследствии окрестили безымянный автомобиль десятого семейства «беременной антилопой». В грузном силуэте ВАЗ-2110 с глубоко утопленными в арки колесами и пухлыми боковинами действительно было что-то от животного в статусе будущей матери…


ВАЗ-2110 нулевой серии


С другой стороны, курс на обтекаемость заводчанами был выбран правильно, ведь именно в таком ключе был, к примеру, выполнен Автомобиль года 1983 Audi 100. Впоследствии уже серийная «десятка» чем-то неуловимо походила на другую модель Audi – «восьмидесятку», а также на Volkswagen Passat B3, и на то были свои причины. Ведь именно в момент работы над будущим ВАЗ-2110 тольяттинские дизайнеры имели возможность внимательно рассмотреть предсерийные немецкие автомобили на Дмитровском полигоне, где «немцы» в 1986 году проходили зимние испытания.



Очевидно, что внешность новейших разработок VW и Audi заметно повлияла на образ «десятки». Как и «восьмидесятка», ВАЗ-2110 получил бочкообразный кузов с мягкими линиями и плавными переходами от объема к объему. Общей «зализанности» способствовали и вклеенные стекла, которые впервые на серийном автомобиле в СНГ появились именно на «десятке».


Левая сторона прототипа по решению кормы очень схожа с… мерседесовской!


Впрочем, во время работы над проектом 2110 вазовские дизайнеры даже сумели «изобрести свой велосипед»: на макете серии 100а в задней части появилось очень любопытное решение – задние фонари с выходом на багажник. Впоследствии именно так было сделано на Mercedes W202, который пошел в серию почти десятилетие спустя!



Еще одно необычное решение на прототипах того периода – форточки в дверях, которые кто-то метко окрестил «стограммовками». Они появились вследствие того, что боковые стёкла опустить было невозможно, поскольку в угоду аэродинамике они имели сферическую поверхость. Форточки-стограммовки держались на прототипах достаточно долго, вплоть до запуска «десятки» в производство, но из-за нетехнологичности пришлось вернуться к более традиционной конструкции с гнутыми стеклами и рамочными дверями. Удивительно, что два года спустя, в 1991-м, такое решение появилось на серийном (!) автомобиле Subaru SVX!



Поскольку по объективным причинам «антилопа все не рожала», изображения пластилиновых макетов просочились в прессу, причем не только советскую. Некоторые западные комментаторы по поводу внешности будущей «десятки» в 1990 году ехидно язвили – дескать, это больше похоже на испорченное изделие кузовного ателье Zagato, чем на советский автомобиль собственной разработки.



Справедливости ради следует признать, что «десятка», особенно в районе нижней части дверей, действительно производит впечатление чуть сырого, не доведенного до конца продукта. Да и задняя оптика смотрится странновато – такое впечатление, что её половинки взяты от разных машин, а еще ситуацию усугубляли маленькие тринадцатидюймовые колеса с дисками от «восьмерки», которые совершенно не подходили по дизайну «десятке».



Впрочем, на все это есть объективные причины – «роды» вышли длительными и довольно тяжелыми. Возможно, повлияло на окончательную внешность автомобиля и то, что его дизайнер Владимир Ярцев к тому времени уже эмигрировал из СССР, поэтому доводкой экстерьера занимались другие люди.


Интерьер потребовал столько же усилий, сколько и внешность


Тем не менее, когда новую модель продемонстрировали сначала в 1993 году в Московском Манеже, а затем годом позже на Парижском автосалоне, публика отреагировала на премьеру довольно активно. Ведь «десятка» по меркам того времени выглядела современно и разительно контрастировала с уже приевшимся силуэтом угловатого «зубила».


Такой логотип появился именно на ВАЗ-2110


Спустя почти двадцать лет с момента начала выпуска к автомобилям десятого семейства относятся более благосклонно – как говорится, время лечит. Свою задачу ВАЗ-2110 выполнил, став к тому же основой для модели «Приора», на которой дизайнеры и конструкторы смогли исправить многое из того, что на «десятке» по разным причинам так, как хотелось, в своё время сделать не удалось.


<a href=»http://polldaddy.com/poll/9237454/»>Каково ваше отношение к ВАЗ-2110?</a>


Читайте также:


Шины, диски на Лада (ВАЗ) 2110 (LADA (ВАЗ) 2110)

LADA 2110 представляет собой серию автомобилей, которые выпускались с 1995 по 2009 год на автомобильном заводе ВАЗ. Наиболее популярная машина семейства — ВАЗ 2110. Опытные модели были выпущены в 1995 году, а серийное производство стартовало в 1996 году.

Какие типоразмеры шин и дисков для автомобиля Лада (ВАЗ) 2110 рекомендует компания KOLOBOX?

Для того, чтобы определить какие покрышки и колесные диски подходят этому транспортному средству, необходимо определить оптимальные размеры, с которыми выпускается авто, а также альтернативные варианты.

В таблице ниже представлены параметры шин (в левой части) и характеристики дисков (в правой части). В компании KOLOBOX каждый водитель машины Лада-2110 сможет получить подробную консультацию и подобрать летние и зимние покрышки, литые или штампованные диски.

2110 комплектуется колесами с диаметрами 13 и 14 дюймов. Ширина автошин варьируется от 175 до 185 мм, а профиль от 70 до 55 %. Таким образом, основные размеры: 175/70 R13, 175/65 R14, 185/60 R14. А альтернативные: 185/65 R13, 195/50 R15 и 185/55 R15.

Подбираем зимние шины для автомобиля LADA (ВАЗ) 2110

Летние покрышки отличаются от зимних особенной структурой, которая начинает затвердевать при опускании температуры до определенного уровня. Это приводит к значительному ухудшению сцепления с дорожным полотном, что в свою очередь снижает безопасность и комфорт во время движения. Поэтому необходимо своевременно обращаться за заменой комплектов автошин.

Несколько моделей покрышек на зиму:


Зимние шины для Лада (ВАЗ) 2110 Kumho KW7400
Maxxis NP3 Arctic Trekker
Kama Kama-505 Ирбис
Contyre Arctic Ice
Kama Kama-519 Euro
Cordiant Winter Drive

Подбираем летнюю резину для автомобиля Лада (ВАЗ) 2110

Многие обладатели авто Лада 2110 обращают свое внимание на низкопрофильные покрышки. Прежде чем решить установить их на машину, стоит узнать их “плюсы” и “минусы”. К положительным сторонам автошин с низким профилем относятся:

  • Увеличение маневренности во время движения.
  • Повышение управляемости: колеса быстро и “остро” реагируют на любые движения руля.

К отрицательным качествам относятся:

  • Узкая резина не отличается упругостью, она не поглощает поступающие от дороги вибрации, передавая их на ходовую. В результате отдельные составляющие этого узла выходят из строя значительно раньше.
  • Снижение комфорта из-за повышения шума.
  • Недостатки дорожного покрытия в виде небольших камней или выбоин могут привести к пробиванию автомобильной резины. Происходит это намного легче, чем с высокой покрышкой.

Несколько вариантов покрышек на лето:


Летние шины для Лада (ВАЗ) 2110 Kama Kama-205
Amtel Planet
Kama Kama-217
Kama Breeze-132
Tunga Zodiak2
Amtel Planet DC

Выбираем диски для авто LADA (ВАЗ) 2110

Лада 2112 имеет следующие характеристики колесных дисков:

  • Ширина 5 дюймов (при этом максимально допустимая ширина — 5,5 дюймов).
  • Диаметр колесного обода 13 и 14 дюймов.
  • Разболтовка 4*98, т.е. четыре крепежных отверстия находятся на окружности, диаметр которой 98 мм.
  • Вылет диска ЕТ 35-40.
  • Диаметр отверстия под ступицу равен 58,6 мм.

Какое давление необходимо поддерживать в покрышках автомобиля Лада (ВАЗ) 2110?

Для 13-ти дюймовых покрышек рекомендуемое давление воздуха находится на отметке 1,9 бар, а для 14-ти дюймовых — 2,0 бар. Наиболее популярное у автолюбителей значение — два бара.

В вопросе контроля и поддержания давление важно не допускать чрезмерное увеличение или уменьшение давления, т.к. это чревато потерей комфорта и снижением износостойкости автомобильной резины.

Как размер шин и дисков влияет на характеристики авто?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.
    Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
    браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.
    Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Понимание и моделирование резонансной передачи энергии типа Фёрстера (FRET)

Об этой книге

Введение

Это краткое описание будет сосредоточено на функциональном использовании и приложениях FRET, начиная с создания FRET в сборках наноструктур и затем приводя примеры приложений для биологов, физиков, химиков, материаловедов, инженеров и других специалистов во многих других областях. нравится FRET как инструмент.Поэтому цель этой части — показать как специалистам, так и неспециалистам, как использовать и анализировать FRET в широком диапазоне приложений.

Ключевые слова

Биовизуализация Биомаркировка Биосенсорные светодиоды с преобразованием цвета Диэлектрическая среда Донор-акцепторные пары Геометрия наноструктур с переносом энергии типа Ферстера Безызлучательная передача энергии Органические светодиоды Фотоэлектрические / фотодетекторные устройства Квантовые точки / лунки

Авторы и аффилированные лица
  1. 2. Школа физико-математических наук, LUMINOUS! Центр передового опыта в области полупроводникового освещения и дисплеевTPI — Институт фотоники, Технологический университет Наньян, Сингапур, Сингапур,
  2. 3.Кафедра физики и астрономии, Огайский университет, Афины, США,
Об авторах

Доктор Хилми Волкан Демир — профессор электротехники и физики. Он является научным сотрудником NRF в Сингапуре и доцентом NANYANG в NTU Singapore, а также является директором-основателем LUMINOUS! Центр передового опыта в области полупроводникового освещения и дисплеев.По совместительству он является доцентом EURYI в Билкентском университете и UNAM — Национальном исследовательском центре нанотехнологий Турции. ). Его текущие исследовательские интересы включают науку и технологию нанокристаллической оптоэлектроники для полупроводникового освещения; экситоника и плазмоника для высокоэффективной генерации и сбора света; беспроводное зондирование in vivo и интеллектуальные имплантаты для будущего здравоохранения.

Доктор Педро Людвиг Эрнандес Мартинес — научный сотрудник LUMINOUS! Центр передового опыта в области полупроводникового освещения и дисплеев при Технологическом университете Наньян в Сингапуре. Его исследовательские интересы включают нанонауку и нанотехнологии, включая плазмонику и полупроводники.

Д-р Александр О. Говоров — профессор кафедры физики и астрономии Университета Огайо в Афинах, США. Он получил докторскую степень в Институте физики полупроводников в России, а затем был научным сотрудником Гумбольдта в Мюнхенском университете. Его исследовательские интересы включают теоретическую физику конденсированного состояния, физику полупроводниковых наноструктур, оптические и транспортные явления, эффекты многих тел, квантовые явления, нанонауку.

Библиографическая информация

Механизмы поиска и распознавания гликозилазы AlkD, выявленные при сканировании FRET-FCS и моделей состояния Маркова.

Значимость

ДНК-гликозилаза восстанавливает повреждения ДНК для поддержания целостности генома и, таким образом, важна для выживания всех организмов.Однако остается давнишней загадкой, как гликозилаза диффундирует по геномной ДНК, чтобы эффективно и точно локализовать разреженные и аберрантные участки поражения в геноме, содержащем многочисленные пары оснований. Ранее экспериментально охарактеризован только режим поиска с высокой скоростью и низкой точностью, в то время как режим поиска с низкой скоростью и высокой точностью не обнаруживается. Здесь мы наблюдали низкоскоростной режим транслокации гликозилазы AlkD и дополнительно анализировали его молекулярные механизмы. Для этого мы разработали интегрированную платформу, объединив сканирование FRET-FCS с моделью состояния Маркова.Мы ожидаем, что эта платформа может быть широко применена для исследования других гликозилаз и ДНК-связывающих белков.

Abstract

ДНК-гликозилаза отвечает за восстановление повреждений ДНК для поддержания стабильности и целостности генома. Однако остается неясным, как гликозилаза может эффективно и точно распознавать повреждения ДНК в огромном геноме ДНК. Была выдвинута гипотеза, что гликозилаза перемещается по ДНК, чередуя быстрый, но невысокий режим диффузии, и медленный, но высокоточный режим при поиске повреждений ДНК.Однако медленная мода не была успешно охарактеризована из-за ограничений в пространственном и временном разрешении современных экспериментальных методов. Используя недавно разработанную платформу сканирующей флуоресцентной резонансной спектроскопии с переносом энергии (FRET) и флуоресцентной корреляционной спектроскопии (FCS), мы смогли наблюдать как медленные, так и быстрые режимы транслокации гликозилазы AlkD на двухцепочечной ДНК (дцДНК), достигая временного разрешения в микросекунду. и пространственное разрешение субнанометра. Молекулярный механизм, лежащий в основе медленной моды, был дополнительно выяснен с помощью модели состояния Маркова, построенной на основе обширного моделирования молекулярной динамики всех атомов.Мы обнаружили, что в медленном режиме AlkD следует асимметричному пути диффузии, то есть вращению с последующей трансляцией. Кроме того, существенная роль Y27 в динамике диффузии AlkD была идентифицирована как экспериментально, так и вычислительно. Наши результаты предоставили механистическое понимание того, как конформационная динамика комплекса AlkD-dsDNA координирует различные режимы диффузии для выполнения поиска повреждений ДНК с высокой эффективностью и точностью. Мы ожидаем, что механизм, принятый AlkD для поиска повреждений ДНК, может быть общим, используемым другими гликозилазами и ДНК-связывающими белками.

Целостность генома важна для выживания всех организмов и передачи признаков потомству. Однако из-за эндогенных метаболитов и агентов окружающей среды постоянно происходит повреждение ДНК, которое угрожает стабильности и целостности всего генома. Чтобы решить эту проблему, были разработаны различные пути восстановления, чтобы гарантировать долговечность точной генетической информации и избежать неправильного восстановления и неисправленных повреждений, вызывающих старение, апоптоз, наследственные заболевания и канцерогенез (1–4). ДНК-гликозилаза — это один из видов ДНК-связывающих белков, ответственных за восстановление повреждений ДНК, и ее нарушение регуляции может привести к онкогенезу (5). Одним из предварительных условий для выполнения этой задачи ДНК-гликозилазой является обнаружение разреженных и аберрантных нуклеиновых оснований среди миллионов или миллиардов нормальных оснований в геноме ДНК (6). Эффективность и точность проверки поврежденных оснований геномной ДНК определяют ее способность восстанавливать повреждения хроматина (7). Однако остается загадкой, как гликозилаза диффундирует вдоль геномной ДНК для эффективного поиска поврежденных оснований после начального неспецифического связывания с ДНК.

Моделирование кристаллических структур, ЯМР и молекулярной динамики (МД) выявило конформацию слабого и сильного связывания между ДНК и белками, включая гликозилазы, репрессоры и белки типа «цинковые пальцы» (8⇓⇓⇓⇓ – 13) . Чередование двух режимов было предложено в качестве общего механизма поиска, используемого белками для эффективного поиска своих сайтов-мишеней (11, 14). Используя существующие методы визуализации одиночных молекул с ограниченным временным (от 10 до 100 мс) и пространственным разрешением (от 20 до 50 нм) (15–21), можно было непосредственно наблюдать только быстрый режим, в котором перемещаются белки. более сотен пар оснований в течение 10 мс.Однако эти методы не имеют достаточного разрешения для разрешения медленного режима, так как в этом режиме белки перемещаются на более короткое расстояние и период времени, чем разрешения методов, так что медленный режим становится неотличимым от стационарного связывания.

Одномолекулярный резонансный перенос энергии флуоресценции (FRET) более чувствителен к изменениям на небольшом расстоянии и успешно применяется для отслеживания относительных движений длиной 1 п.н. между ДНК и нуклеосомой (22).Однако, по нашей оценке, чтобы исследовать режимы быстрой и медленной диффузии гликозилазы для одновременного поиска очагов поражения, требуется как нанометровое пространственное разрешение, так и микросекундное временное разрешение. Следовательно, обычно используемая микроскопия на основе камеры не подходит для проведения измерений FRET одиночных молекул из-за ее ограниченного временного разрешения (~ 10 мс). В связи с этим мы решили объединить FRET с нашей ранее разработанной сканирующей флуоресцентной корреляционной спектроскопией (FCS) на основе конфокального микроскопа (23), чтобы разработать метод сканирования FRET-FCS.Этот метод может обеспечить динамику белка с субнанометровым пространственным разрешением и микросекундным временным разрешением, что на три порядка больше по сравнению с миллисекундным разрешением, обеспечиваемым предыдущими методами (16⇓⇓ – 19), и служит полезной платформой для мониторинга одномерной (1D) диффузии. режимы гликозилазы на двухцепочечной ДНК (дцДНК).

В этом исследовании мы использовали сканирование FRET-FCS с высоким разрешением для успешного захвата как быстрых, так и медленных режимов диффузии на короткие расстояния (21 ~ 99 пар оснований) Bacillus cereus алкилпурингликозилазы D (AlkD), ДНК-гликозилаза алкилпурина, нацеленная на ряд разнообразных субстратов алкилпурина (24, 25).Мы обнаружили, что быстрый режим имеет такую ​​же шкалу времени диффузии (~ 0,12 мкс на п.н.), что и для других систем белок-ДНК (19, 26-29). Что еще более интересно, мы непосредственно зафиксировали медленный режим (~ 15 мкс на п.н.) диффузии AlkD вдоль дцДНК, который ранее не был охарактеризован экспериментально. Для дальнейшего анализа лежащего в его основе молекулярного механизма мы построили модель марковского состояния (МСМ) (30 – 49) на основе обширных МД-симуляций с накопленным временем ∼ 15 мкс инициируется кристаллической структурой комплекса AlkD – ДНК (50).Одна синтетическая траектория длительностью 1 мс была сгенерирована в соответствии с матрицей переходных вероятностей МСМ, чтобы визуализировать непрерывные циклы диффузии AlkD по дцДНК, временной масштаб которых не может быть достигнут с помощью обычных МД-моделирования. Мы также обнаружили, что медленный режим состоит из ограничивающего скорость вращательного движения, за которым следует последовательное поступательное движение AlkD на дцДНК. Более того, скорость диффузии на пару оснований, оцененная с помощью MSM, согласуется со скоростью диффузии в медленном режиме, измеренной сканированием FRET-FCS, что позволяет предположить, что медленно диффундирующий AlkD принимает конформацию, которая очень напоминает кристаллическую структуру AlkD в комплексе с повреждением ДНК ( 50).Кроме того, мы точно определили важную роль остатка Y27 в определении динамической диффузии AlkD на дцДНК. Таким образом, мы объединили сканирующие измерения FRET-FCS и MSM, чтобы выяснить, как режимы диффузии регулируются конформационной динамикой комплексов AlkD-ДНК для достижения эффективного поиска цели, открывая путь к исследованию распознавания и удаления повреждений в AlkD и других ДНК- связывающие белки.

Результаты

AlkD отображает 1D диффузию на дцДНК в двух разных режимах.

Как показано на фиг. 1 A , Cy5-меченный AlkD присутствовал в растворе для временного связывания и латеральной диффузии (1D) на иммобилизованной Cy3-меченной дцДНК. Самодельный инвертированный конфокальный флуоресцентный микроскоп, оснащенный пьезоэлементом, использовался для захвата сканирующих кривых FRET-FCS, которые были рассчитаны посредством взаимной корреляции между сигналами Cy3 и Cy5.

Рис. 1.

Сканирующий анализ FRET-FCS для выявления одномерной диффузии AlkD на дцДНК. ( A ) Схема сканирующего анализа FRET-FCS.Cy3-меченная биотинилированная дцДНК была иммобилизована на предметном стекле микроскопа, пассивированном ПЭГ, посредством взаимодействия биотин-стрептавидин. Связывание Cy5-меченного AlkD на дцДНК и его одномерная диффузия на дцДНК вызывают появление и изменение эффективности Cy3 / Cy5 FRET, соответственно. ( B ) Репрезентативная кривая сканирования FRET-FCS AlkD на дцДНК длиной 45 п.н., рассчитанная на основе корреляции между сигналами Cy3 и Cy5 (черная кривая). Три времени релаксации (τ медленный , τ быстрый и τ dis ) компонентов отрицательной корреляции, вызванных биохимическими процессами, приводящими к изменению эффективности Cy3 / Cy5 FRET, были извлечены посредством экспоненциального затухания (красная кривая). ( C ) τ медленный , τ быстрый и процент режима быстрой диффузии в различных солевых условиях, сканирующие кривые FRET-FCS которых показаны в приложении SI , рис. S1 G . Если не указано иное, в других экспериментах использовали 100 мМ NaCl.

От 0,03 до 100 мс наши сканирующие кривые FRET-FCS показали рост взаимной корреляции, который был вызван процессами, приводящими к изменениям сигналов Cy3 – Cy5 FRET в этой шкале времени. Из сканирующих кривых FRET-FCS в этом диапазоне были выделены три антикорреляционные компоненты (рис.1 B ). Мы отнесли самый медленный компонент к процессу связывания и диссоциации между AlkD и иммобилизованной дцДНК, поскольку время его релаксации (τ dis = 44 ± 4 мс) хорошо согласуется со временем релаксации (66 ± 18 мс), оцененным независимо от белка. –DsDNA скорости связывания и диссоциации ( SI, приложение , таблица S1) с использованием нашего флуоресцентного микроскопа полного внутреннего отражения для одиночных молекул (подробности см. В SI, приложение ). Как и ожидалось, когда длина дуплекса ДНК уменьшилась до 8 п.н., чтобы полностью исключить одномерную диффузию AlkD, сканирование кривой FRET-FCS показало только один антикорреляционный компонент, вызванный связыванием и диссоциацией между AlkD и дцДНК ( SI Приложение , рис.S1 A ). Дополнительные контрольные эксперименты также показали, что два быстрых компонента антикорреляции в этом диапазоне не были произведены дыханием дцДНК или движением красителей и линкеров ( SI Приложение , Рис. S1 B ). Кривые FRET-FCS для одной молекулы каждой отдельной молекулы все демонстрируют два компонента диффузии ( SI Приложение , рис. S1, C и D ), что указывает на то, что они не были вызваны гетерогенностью иммобилизованных молекул. Таким образом, мы ожидали, что оставшиеся два компонента (τ быстрый и τ медленный ) были вызваны одномерной диффузией AlkD на дцДНК.

Затем мы стремились проанализировать происхождение двух компонентов диффузии. Для этого мы выполнили моделирование методом Монте-Карло (подробности см. В SI, приложение ) для моделирования случайных траекторий диффузии AlkD и построения кривых FRET-FCS, предполагая, что эффективность FRET зависит как от относительного расстояния, так и от ориентации диполя между Cy3 и Cy5 ( SI Приложение , рис. S1 E ). Это позволяет нам проверить, являются ли связанные с диффузией вращательные движения AlkD вокруг дцДНК причиной двух диффузионных компонентов в наших измеренных кривых FRET-FCS.Смоделированные кривые FRET-FCS отображали две антикорреляционные составляющие, времена релаксации которых примерно в 200 раз отличались друг от друга ( SI Приложение , рис. S1 F ). Результаты моделирования не согласуются с нашими измеренными временами релаксации (τ быстро = 0,22 ± 0,01 мс и τ медленное = 4,1 ± 0,3 мс, которые различаются примерно в 20 раз), что опровергает предполагаемую модель и предполагает, что две компоненты диффузии не были вызваны диффузионно-связанными вращательными движениями AlkD.Это понятно, поскольку оба красителя были связаны с биомолекулами одной ковалентной связью, и поэтому предполагается, что ориентации диполей Cy3 и Cy5 наиболее свободно перемещаются. В результате их эффективность FRET зависела только от их относительного расстояния. Наконец, мы обнаружили, что концентрация соли по-разному влияет на два компонента диффузии (рис. 1 C и SI, приложение , рис. S1 G ), дополнительно подтверждая, что два компонента диффузии вызваны разными режимами.В частности, высокая ионная сила, которая ослабляет взаимодействия между AlkD и дцДНК, снижает время релаксации обоих компонентов диффузии и увеличивает вклад быстрого компонента. Следовательно, время релаксации быстрого компонента более чувствительно к концентрации соли, чем медленного компонента. Вместе эти результаты предполагают, что два компонента диффузии, чьи времена релаксации примерно в 10-20 раз отличаются друг от друга, вероятно, были вызваны двумя режимами одномерной диффузии комплексов AlkD-dsDNA, обладающих разными взаимодействующими конформациями и силой.

Время пребывания AlkD на пару оснований, полученное из времен релаксации.

Сначала мы исследовали влияние длины дцДНК на времена релаксации τ быстрый и τ медленный (Рис. 2 A и SI Приложение , Рис. S2). Когда длина дцДНК уменьшилась с 99 до 21 п.н., τ fast уменьшилось с ∼0,3 до ∼0,1 мс, а доля быстрого компонента также уменьшилась с ∼80% до ∼20%. Напротив, τ slow был менее чувствителен к длине дцДНК и всегда оставался на уровне около 3 мс (рис.2 А ). В этом отношении время пребывания AlkD на каждой паре оснований в быстром режиме можно оценить, исследуя кривые FRET-FCS дцДНК разной длины. В частности, мы сгенерировали сканирующие кривые FRET-FCS AlkD на дцДНК разной длины с помощью моделирования Монте-Карло (подробности см. В приложении SI ). Два параметра, а именно время пребывания AlkD на внутренней паре оснований (τ int ) и на концевой паре оснований (τ ter ), были введены для выполнения моделирования Монте-Карло.Когда τ int = 0,12 ± 0,08 мкс и τ ter = 11 ± 2 мкс, временные шкалы, оцененные на основе моделирования методом Монте-Карло, лучше всего соответствуют экспериментально измеренным общим временным шкалам для τ fast при различных длинах дцДНК (рис. . 2 B и SI Приложение , рис. S3 A ). Основываясь на этом результате, время пребывания AlkD составляет 0,12 ± 0,08 мкс на пар оснований в его быстром одномерном режиме диффузии, а соответствующий коэффициент диффузии D = (8 ± 5) × 10 6 пар оснований 2 / с равен в пределах диапазона известных значений для других белков гликозилазы (19).

Рис. 2.

Диффузия AlkD на дцДНК разной длины. ( A ) τ медленный , τ быстрый и процент быстрой моды, извлеченный из сканирования кривых FRET-FCS AlkD на дцДНК разной длины, показанных в приложении SI , рис. S2. ( B ) Корреляция между измеренным τ fast , показанным в A , и смоделированным τ fast с дцДНК разной длины, извлеченной из моделирования Монте-Карло, показанного в приложении SI , рис.S3 А .

Мы обнаружили, что τ slow очень чувствителен к последовательностям ДНК при использовании двух дцДНК одинаковой длины, но с разными последовательностями (21 п.н. против 21 п.н.-2, рис. 2 A ). Когда последовательность ДНК изменялась с 21 п.о. на 21 п.н.-2, τ slow увеличивалось с 2 до 4 мс, и доля медленного компонента также увеличивалась с ~ 60% до ~ 80%. В отличие от этого, последовательность ДНК имела маргинальное влияние на τ fast . Поскольку τ slow не чувствителен к длине дцДНК (рис.2 A ), мы не можем однозначно оценить τ int и τ ter медленной компоненты, используя метод, описанный выше ( SI Приложение , Рис. S3 A ). Чтобы обеспечить грубую оценку времени пребывания AlkD на каждой паре оснований в медленном режиме, мы аппроксимируем экспериментальные данные FRET-FCS дцДНК длиной 45 п.н., установив τ int : τ ter = 1: 1, 1 : 10 и 1: 100, соответственно, в моделировании Монте-Карло. Соответственно, моделирование произвело три соответствующих набора параметров τ int = 17 ± 1 мкс и τ ter = 17 ± 1 мкс для τ int : τ ter = 1: 1, τ int = 11 ± 1 мкс и τ ter = 110 ± 8 мкс для τ int : τ ter = 1:10 и τ int = 2.2 ± 0,2 мкс и τ ter = 220 ± 20 мкс для τ int : τ ter = 1: 100, все из которых могут соответствовать экспериментальным значениям медленного режима (4,1 ± 0,3 мс) ( SI Приложение , рис. S3 B ). Хотя τ int : τ ter значительно отличается по трем наборам параметров, время пребывания AlkD на внутренней паре оснований (τ int ) аналогично и служит подходящей метрикой для оценки масштабов времени диффузии. Таким образом, мы оценили, что AlkD тратит от 2 до 17 мкс на bp в медленном режиме.

Динамика диффузии, характеризуемая моделью состояния Маркова.

Недавнее исследование с помощью моделирования MD предложило, что комплекс AlkD-dsDNA может чередоваться между свободно взаимодействующей конформацией для общего поиска вдоль dsDNA и тесно взаимодействующей конформацией в кристаллической структуре при инициировании вырезания (13). Чтобы установить связь между конформацией комплекса AlkD-dsDNA и динамикой 1D диффузии, которую мы зафиксировали, мы построили MSM на основе обширного моделирования MD для всех атомов на основе опубликованной структуры AlkD (Protein Data Bank [PDB] ID: 5CL3 ) (50).Было выполнено моделирование MD с агрегированным временем моделирования 15 мкс (подробности см. В приложении SI ), и для построения MSM было использовано более 700 000 конформаций MD.

Комплекс AlkD – dsDNA в нашем моделировании принял конфигурации, очень похожие на кристаллическую структуру (PDB ID: 5CL3). Во-первых, дцДНК была изогнута до такой же степени, что и кристаллическая структура (рис. 3 A ). Угол изгиба — это общепринятая метрика для измерения изгиба дцДНК (51) (подробности см. В приложении SI ).Мы обнаружили, что угол изгиба дцДНК в нашем моделировании охватывал широкий диапазон от 20 ° до 100 °, а центр распределения составлял ~ 59 °. Это хорошо соответствовало углу изгиба (~ 55 °) кристаллической структуры. Во-вторых, большинство взаимодействий белок-ДНК, наблюдаемых в кристаллической структуре, хорошо поддерживалось в наших МД-моделированиях (Рис. 3 B и см. SI Приложение для подробностей). Например, гидроксильная группа Y27 была связана водородом с атомами азота в азотном основании ДНК.Кроме того, атомы азота в боковой цепи R148 образуют солевые мостики с фосфатной группой соседнего аденина. Кроме того, гидрофобное кольцо W109 и W187 образует CH-π-взаимодействие с соседним нуклеосахаром. В целом дцДНК была связана с AlkD таким же образом, как и в кристаллической структуре.

Рис. 3.

Моделирование марковского состояния комплекса AlkD – дцДНК. ( A ) Распределение угла изгиба дцДНК, полученное при моделировании МД (красная кривая). Для сравнения угол изгиба, рассчитанный с использованием кристаллической структуры (PDB ID: 5CL3), показан черной линией.( B ) Сравнение расстояний белок-ДНК между МД-моделированием (красный кружок с полосой ошибок) и кристаллической структурой (черный квадрат) (подробности см. В приложении SI ). «G6» и «A7» представляют G с идентификатором остатка 6 и A с идентификатором остатка 7 в нашей имитационной модели соответственно. ( C ) Репрезентативные конформации трех основных метастабильных состояний с двух разных точек зрения. дцДНК и AlkD показаны индиго и серым цветом соответственно. Спирали, близкие к дцДНК, показаны отдельными цветами, а также один фосфат в синей сфере, чтобы продемонстрировать конформационное изменение AlkD.Среднее время первого прохождения, оцененное по данным MSM, представлено рядом со стрелками. ( D ) Проекции конформаций AlkD-dsDNA на первый tIC как функции времени для траектории длительностью 1 мс, генерируемой на основе MSM. Индекс штата указан справа. Внизу расширен сегмент от 0 до 20 мкс. ( E ) Проекция конформаций MD на угол, описывающий вращение AlkD вокруг дцДНК (ось y ) и расстояние трансляции AlkD вдоль dsDNA (ось x ).Контурные графики каждого метастабильного состояния также показаны с популяцией в скобках.

Чтобы полностью выяснить динамику диффузии AlkD вдоль дцДНК, мы использовали анализ компонентов, не зависящих от временной структуры (tICA) (34, 52, 53), чтобы определить самые медленные релаксирующие степени свободы, и построили MSM с помощью MSMbuilder (54) (см. SI Приложение для деталей). Параметры для построения МСМ были подтверждены обобщенным матричным коэффициентом Рэлея (40, 41) ( SI Приложение , рис.S4 и S5). Мы идентифицировали три метастабильных состояния, когда AlkD диффундирует по одной паре оснований. Помимо состояний до (S1) и после транслокации (S3), мы идентифицировали промежуточное состояние транслокации (S2, рис. 3 C ). Чтобы дополнительно визуализировать динамику диффузии, мы сгенерировали синтетическую траекторию длительностью 1 мс путем дискретизации матрицы вероятности перехода нашего MSM микросостояния с 1000 состояниями с временем задержки 15 нс (подробности см. В приложении SI ). Как показано на рис. 3 D , комплекс AlkD-ДНК колебался между состояниями до и после транслокации через промежуточное состояние (S2) несколько раз в течение 1 мс, а средняя шкала времени для транслокации по одной паре оснований составляла 15 ∼20 мкс (рис.3 C и D ). Эти временные шкалы, оцененные с помощью МСМ, хорошо совпадают с нашими экспериментально измеренными временами пребывания, от 2 до 17 мкс на внутреннюю пару оснований в медленном режиме.

Асимметричный путь транслокации по одной паре оснований.

Наш MSM продемонстрировал, что транслокация по одной паре оснований идет по асимметричному пути с вращательным движением, за которым следует последовательное поступательное движение. Как показано на фиг. 3 C и E , от S1 к S2, AlkD повернулся на ~ 34 ° вокруг дцДНК; от S2 к S3, слайд AlkD ∼3.5 Å вдоль дцДНК, что соответствует длине одной пары оснований (55). Кроме того, мы обнаружили, что временные рамки этих двух конформационных переходов были радикально разными (Fig. 3 C ). Переход от S1 к S2, вызванный вращением AlkD вокруг дцДНК, был этапом ограничения скорости, который происходил на промежутке от 13 до 17 мкс, в то время как переход от S2 к S3, вызванный скользящим движением AlkD, занимал всего 1,3–1,5 мкс, 10 раз быстрее, чем от S1 до S2. Это можно объяснить степенью реконфигурации сети водородных связей во время конформационного изменения ( SI Приложение , рис.S6). От S1 до S2 было разорвано ~ 4,5 водородных связей, в то время как одновременно образовалось ~ 7,0 водородных связей; от S2 к S3 отрыв ~ 3.1 водородных связей сопровождался образованием ~ 3.0 водородных связей. В этом отношении вращение AlkD вокруг дцДНК, идентифицированное как переход S1-to-S2, вовлекает более значительные реконфигурации водородных связей для завершения его конформационных изменений и, следовательно, становится лимитирующим этапом в пути асимметричной транслокации.

Влияние остатка Y27 на динамику диффузии.

Предыдущие исследования выявили несколько аминокислотных остатков, которые необходимы для распознавания и удаления поврежденной ДНК (56⇓ – 58). Однако роль каких-либо остатков AlkD в динамике диффузии белка не исследовалась. Здесь мы сосредоточились на остатке Y27, который сохранял свою водородную связь с нуклеотидами в течение всего цикла диффузии ( SI, приложение , рис. S7). Гидроксильная группа гидрофильного остатка Y27 вставляется в малую бороздку ДНК и контактирует с азотистым основанием вместо остова (57).Чтобы отдельно изучить эффекты водородных связей и стерических взаимодействий, мы разработали мутанты Y27F и Y27A соответственно. Оба мутанта устранили водородную связь, в то время как мутация Y27A могла еще больше уменьшить размер боковой цепи. Экспериментальная сканирующая кривая FRET-FCS показала, что Y27A ускоряет диффузию как в быстром, так и в медленном режимах, в то время как мутация Y27F практически не влияет на скорость транслокации (рис. 4 A и SI Приложение , рис. S8), предполагая, что это действительно так. стерический эффект, а не водородная связь, которая играет ключевую роль в определении динамики диффузии.Чтобы дополнительно проанализировать молекулярный механизм Y27 на динамику диффузии, моделирование мутантов было инициировано из конформационной области, соответствующей ограничивающей скорость стадии вращения при транслокации. Стоит отметить, что наши симуляции были начаты с кристаллической структуры с повреждением ДНК, и поэтому мы можем только изучить, как мутанты влияют на скорость медленного режима. В частности, мы выбрали 10 конформаций из области перехода между состоянием S1 и состоянием S2. Для каждой конформации мы сгенерировали соответствующую мутацию Y27, чтобы инициировать две 50-нс моделирование MD (подробности см. В приложении SI ).Для сравнения, эти 10 конформаций также использовались для моделирования моделирования дикого типа. В соответствии с экспериментальным наблюдением, моделирование с помощью МД также показало, что мутация Y27A увеличивала скорость (меньшее значение устойчивости; см. Подробности в SI Приложение ), в то время как мутация Y27F демонстрировала такую ​​же скорость, как и мутация дикого типа (рис. 4 A ). Поскольку стерический эффект Y27 играет доминирующую роль в определении динамики диффузии AlkD вдоль дцДНК, мы исследовали ван-дер-ваальсовы взаимодействия между Y27 и соседними с ним белковыми остатками, а также нуклеиновыми кислотами (рис.4 B и SI Приложение , рис. S9 и S10). Мы обнаружили, что Y27 дикого типа испытывает самые сильные ван-дер-ваальсовы взаимодействия со своим окружением, которые были немного ослаблены у Y27F, но значительно уменьшены у Y27A. Этот результат подтвердил вышеприведенное утверждение о том, что объемная боковая цепь Y27 или Y27F приводит к сильному стерическому эффекту и, таким образом, препятствует одномерной диффузии, в то время как Y27A имеет меньший объем и ускоренную диффузию. Дальнейший анализ выявил белковые остатки M24, M28 и W109, которые в значительной степени способствовали стерическому эффекту, вызываемому Y27 или Y27F (рис.4 C и SI Приложение , рис. S9).

Рис. 4.

Влияние остатка Y27 на динамику диффузии. ( A ) Сравнение между значением сопротивления, вычисленным из моделирования MD (красные столбцы), и временем релаксации, полученным в результате экспериментов (темно-серые столбцы) для AlkD дикого типа, AlkD-Y27A и AlkD-Y27F. Средние и стандартные значения рассчитанного значения сопротивления оценивались с помощью алгоритма начальной загрузки (подробности см. В приложении SI ). ( B ) Распределение ван-дер-ваальсовых взаимодействий между Y27 (дикий тип, черная кривая) и окружающими его остатками (включая остатки с 23 по 29, 109 и все нуклеиновые кислоты) по сравнению с таковым в Y27F (красная кривая) и мутанты Y27A (синяя кривая).( C ) Типичные конформации Y27, Y27F и Y27A в комплексе AlkD – дцДНК. Остаток 27 показан в виде палочек, а нуклеиновые кислоты показаны светло-синей поверхностью. W109, M28 и M24 выделены оранжевым цветом, а остатки других белков показаны серебром.

Обсуждение

Гликозилаза AlkD является важным ферментом, ответственным за восстановление повреждений ДНК за счет использования уникального механизма распознавания без переворота оснований (50, 56, 58). Тем не менее, долгое время оставался вопрос, как ДНК-гликозилазы могут эффективно и точно определять местонахождение повреждений ДНК.Было высказано предположение, что ДНК-гликозилазы, такие как AlkD, могут выбирать между быстрым и медленным режимами поиска повреждений ДНК. К сожалению, существующие методы визуализации флуоресценции одиночных молекул не имеют достаточного разрешения для захвата медленного режима. В этом исследовании наша недавно разработанная сканирующая платформа FRET-FCS с улучшенным пространственным и временным разрешением позволила нам изучить диффузию AlkD вдоль дцДНК с гораздо более высоким разрешением, что позволило одновременно захватить быструю и медленную одномерную диффузию AlkD.В быстром режиме AlkD тратит ∼0,12 мкс на каждую пару оснований, что соответствует константе одномерной диффузии ∼8 × 10 6 п.н. 2 ⋅s −1 . Это похоже на сообщаемые скорости диффузии других белков, включая гликозилазы hOgg1, MutY и MutM, вдоль дцДНК (19). В медленном режиме AlkD тратит от 2 до 17 мкс на каждую пару оснований со 100 мМ NaCl, что соответствует константе одномерной диффузии от 6 × 10 4 до 5 × 10 5 п.н. 2 мкс −1 .В среднем, AlkD тратит ~ 70 мс на дцДНК во время каждого события связывания и диффундирует через 70–190 п.н. в медленном режиме до диссоциации, что выходит за пределы обнаружения существующих методов визуализации одиночных молекул. Это подчеркивает преимущества нашей платформы FRET-FCS.

Недавнее исследование с помощью моделирования MD идентифицировало две различные конформации AlkD-dsDNA, состояние слабого связывания и состояние сильного связывания, которые, как предполагалось, вызывают разные скорости диффузии (13). Аналогичным образом было показано, что ДНК-связывающий домен EngHD переключается между двумя различными конформациями, чтобы модулировать скорость его диффузии (11).Наше МД моделирование продемонстрировало, что AlkD-дцДНК принимает кристаллическую структуру, подобную конформации с сильным связыванием, и МСМ оценил масштаб времени диффузии от 15 до 20 мкс на п.н., что согласуется с измеренным значением медленной моды. Это подтвердило наше утверждение, что медленная мода соответствует конформации сильной связи, наблюдаемой в кристаллической структуре и в наших МД-моделированиях, в то время как быстрая мода, вероятно, вызвана конформацией слабой связи, идентифицированной предыдущим МД-моделированием (13). В совокупности данные экспериментов и вычислений подтверждают модель, согласно которой AlkD – дцДНК переключается между различными конформациями во время поиска цели (рис.5).

Рис. 5.

Механистическая схема распространения и поиска цели AlkD. Измененные базы показаны красным.

Объединив наши находки с предыдущими исследованиями, мы предложили следующую кинетическую схему, чтобы выяснить, как конформационная динамика AlkD и dsDNA взаимодействует друг с другом, чтобы обеспечить эффективный поиск и распознавание мишеней (Fig. 5). AlkD-dsDNA принимает конформацию со свободным связыванием в режиме быстрой диффузии, который является обычным режимом поиска для скрининга немодифицированной dsDNA с высокой эффективностью.Хотя AlkD может иногда переходить в свой медленный режим на немодифицированной дцДНК, искажения структуры дцДНК, вызванные модифицированными или несовпадающими основаниями, вероятно, будут способствовать медленному режиму диффузии за счет стабилизации белка в его кристаллической конформации с образованием комплекса с прочным связыванием, что дает AlkD достаточно времени для тщательного поиска рядом с поражением (13). После обнаружения модифицированного основания образуется комплекс для удаления AlkD-dsDNA, чтобы завершить распознавание мишени и инициировать последующее удаление очага поражения.Мы предположили, что аналогичные механизмы поиска используются гликозилазой человека AAG, которая также имеет структуру слабого и сильного связывания с ДНК (12).

Наш MSM, построенный на основе полностью атомного МД-моделирования, предоставил дополнительную информацию о механизмах диффузии AlkD. Во-первых, AlkD демонстрирует вращательные движения вокруг спиральной структуры дцДНК во время ее одномерной диффузии, механизма, используемого многими ДНК-связывающими белками (19). Наш МСМ дополнительно продемонстрировал, что диффузия AlkD по одной паре оснований содержала два последовательных движения в медленном режиме.Движение с вращением на ~ 34 ° является этапом ограничения скорости, который в 10 раз медленнее, чем скользящее движение по одной паре оснований. Следовательно, мутации, влияющие на ограничивающее скорость вращательное движение, также должны влиять на общую скорость диффузии медленного режима. Действительно, наши мутантные симуляции показывают, что Y27A может ускорять вращательное движение и, следовательно, должен также увеличивать общую скорость режима медленной диффузии. Наши сканирующие измерения FRET-FCS мутанта Y27A показывают более высокую скорость диффузии по сравнению с диким типом, и, таким образом, подтвердили наше теоретическое предсказание, основанное на модели асимметричной транслокации.Это согласие между моделированием и экспериментами по влиянию мутанта на скорость диффузии AlkD косвенно подтверждает предложенный нами механизм асимметричного движения. Кроме того, времена релаксации быстрой и медленной мод, которые отличались друг от друга в 10-20 раз, подвергались влиянию мутаций Y27A и Y27F в аналогичной тенденции ( SI Приложение , Рис. S8), что позволяет предположить, что AlkD в быстрый и медленный режимы могут иметь сходную сеть взаимодействия, окружающую остаток Y27. Мы также отмечаем, что в нескольких предыдущих исследованиях было достигнуто прямое сравнение прогнозов МСМ и экспериментальных наблюдений, включая FRET (59), и, в частности, была разработана расширенная структура марковской модели для объединения экспериментальных данных и данных моделирования для повышения точности предсказанной биомолекулярной динамики МСМ ( 60).В этом исследовании наши МСМ исследуют только диффузию AlkD по одной паре оснований (с самой медленной шкалой времени ~ 15 мкс), в то время как временное разрешение нашего эксперимента FRET с одной молекулой ограничено 10 мкс. Следовательно, необходимы экспериментальные измерения со значительно более точным временным разрешением или МСМ, описывающие транслокацию по значительно более длинной ДНК, чтобы позволить прямое сравнение между динамикой переходов между различными метастабильными состояниями в наших МСМ и экспериментальными наблюдаемыми.

Здесь, объединив наш недавно разработанный метод сканирования FRET-FCS с МСМ, построенным на основе обширного МД-моделирования, мы разработали интегративную платформу для выяснения динамики атомистической диффузии белков на дцДНК.Наши результаты показали, что AlkD использует общий режим быстрой диффузии для прохождения через немодифицированные основания с высокой эффективностью и режим медленной диффузии для тщательного поиска рядом с участком поражения. Конформационная динамика комплекса AlkD – дцДНК регулирует трансформацию между двумя режимами диффузии для обеспечения эффективности и точности процессов поиска цели. Подобные механизмы, вероятно, используются другими гликозилазами и ДНК-связывающими белками.

Материалы и методы

Сканирующие измерения FRET-FCS.

PEG-пассивированные слайды инкубировали со стрептавидином 0,05 мг / мл в течение 3 мин. Затем биотинилированная дцДНК была специфически прикреплена к ПЭГ-пассивированным предметным стеклам посредством взаимодействия между биотином и стрептавидином. Свободно диффундирующий Cy5-AlkD добавляли в проточные клетки микроскопа для изучения взаимодействия между Cy3-dsDNA и Cy5-AlkD. Если не указано иное, эксперименты со сканированием FRET-FCS проводили при 25 ° C в буфере (50 мМ Tris⋅HCl, pH 7,5, 100 мМ NaCl, 0,1 мМ EDTA, 1 мМ DTT и 1% BSA) с системой поглощения кислорода. содержащий 3 мг / мл глюкозы, 100 мкг / мл глюкозооксидазы, 40 мкг / мл каталазы, 1 мМ циклооктатетраен, 1 мМ 4-нитробензиловый спирт и 1.5 мМ 6-гидрокси-2,5,7,8-тетраметил-хроман-2-карбоновая кислота (61, 62).

Сканирующие измерения FRET-FCS проводились на самодельном конфокальном микроскопе на основе флуоресцентного микроскопа Zeiss AXIO Observer D1 с масляно-иммерсионным объективом (Zeiss; 100 ×; числовая апертура 1,4) и твердотельным 488- Лазеры с возбуждением на 532 и 640 нм (Coherent; OBIS Smart Lasers). Пьезо-нано-позиционный столик (PI) был собран на столике микроскопа и управлялся многофункциональной платой ввода-вывода (National Instruments; PCI-6289) со специальным скриптом Labview (National Instruments) для достижения точного наноразмерного сканирования и позиционирования.Для экспериментов со сканированием FRET-FCS скорость сканирования составляла 0,1 мкм / с. Мощность лазера на образцах составляла ~ 5 мкВт. Сигналы флуоресценции от образца проходили через точечное отверстие (диаметр 50 мкм) и разделялись дихроичным зеркалом (T635lpxr, Chroma), которое дополнительно фильтровалось полосовыми фильтрами ET585 / 65m (для Cy3, Chroma) и ET700 / 75m (для Cy5, Chroma) до обнаружения двумя лавинными фотодиодными детекторами (APD) (Excelitas; SPCM-AQRH-14). Кросс-корреляция сигналов флуоресценции рассчитывалась с помощью коррелятора (Correlator.com; Flex02-01D). Для каждого экспериментального условия выполняли три или более идентичных повтора. Каждую повторность собирали в течение 5 мин.

Сканирующие кривые FRET-FCS между 30 мкс и 250 мс были аппроксимированы следующим образом: G (τ) = Afast⋅e − ττfast + Aslow⋅e − ττslow + Adis⋅e − ττdis,

для извлечения трех времен релаксации. Процент режима быстрой диффузии был рассчитан с помощью Afast / (Afast + Aslow).

МД моделирования.

Кристаллическая структура AlkD [PDB ID: 5CL3 (50)] была использована в качестве структурной основы для построения модели до транслокации и модели после транслокации для исследования диффузии AlkD по одной паре оснований.Были сделаны ручные модификации, чтобы гарантировать соответствие длины и последовательности пар оснований между состояниями до и после транслокации. Предварительные пути были созданы с использованием алгоритма Climber (63, 64), и 30 репрезентативных конформаций были отобраны из предварительных путей ( SI Приложение , рис. S11) для начала первого раунда моделирования MD. Для каждой конформации были выполнены минимизация энергии и уравновешивание, а затем одно моделирование NVT продолжительностью 50 нс при 298 К. Конформации в первом раунде моделирования были собраны и использованы в качестве конформационной основы для затравки обширных моделей MD для построения MSM.Силовое поле Amber99sb-ildn (65) использовалось для моделирования как белка, так и нуклеотидов. Все МД-моделирование проводилось с помощью пакета Gromacs 5.0.4 (11). См. SI Приложение для получения подробной информации о построении модели и моделировании MD.

Модель Марковского государства.

Конформационный ансамбль из моделирования MD 300 × 50 нс служил структурной основой для построения MSM с использованием MSMbuilder (54). В частности, tICA (34, 52, 53) использовался для определения самых медленных релаксирующих степеней свободы (подробности см. В приложении SI ).Обобщенный матричный коэффициент Рэлея (40, 41) использовался для проверки параметров для построения МСМ, включая пары атомов, число tIC, время задержки tIC и количество микросостояний ( SI, приложение , рис. S4 и S5). При оптимальных параметрах конформационный ансамбль MD был окончательно разделен на 1000 микросостояний с помощью алгоритма K-center (66, 67) ( SI, приложение , рис. S5, , A, и S12), и было выбрано собственное время задержки 15 нс. для рендеринга модели марковской ( SI Приложение , рис.S13). Чтобы получить представление о молекулах, 1000 микросостояний были дополнительно сгруппированы в макросостояния на основе их кинетического сходства. См. Приложение SI для получения подробной информации о построении и проверке MSM.

Дополнительные экспериментальные и расчетные детали см. В приложении SI .

Доступность данных.

Необработанные данные, используемые для построения всех фигур, можно найти в наборе данных S1. Все данные исследования включены в статью SI и приложение .

Благодарности

Этот проект поддержан фондами Национального фонда естественных наук Китая (гранты 21922704, 21877069 и 31570754, предоставленные C.C .; 21233002 и 21521003 по X.S.Z .; и 21733007 и 21803071 в LZ), Национальная программа 1000 молодых талантов Китая в LZ и Совет по исследовательским грантам Гонконга (гранты 16307718, 16318816, AoE / P-705/16 и T13-605 / 18-W до XH) .

Сноски

  • Вклад авторов: X.S.Z., X.H. и C.C. спланированное исследование; S.P., X.W., L.Z. и S.H. проведенное исследование; С.П., X.W. и Л.З. внесены новые реагенты / аналитические инструменты; S.P., X.W., L.Z. и C.C. проанализированные данные; и С.П., X.W., L.Z., X.S.Z., X.H. и C.C. написал газету.

  • Авторы заявляют об отсутствии конкурирующей заинтересованности.

  • Эта статья представляет собой прямое представление PNAS.

  • Эта статья содержит вспомогательную информацию в Интернете по адресу https://www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10.1073/pnas.2002971117/-/DCSupplemental.

  • Copyright © 2020 Автор (ы). Опубликовано PNAS.

Визуализация живых клеток межклеточной изменчивости в активности репортера каспазы-8 FRET и моделирование траектории клеточной судьбы — Набор данных — База данных HMS LINCS

Протокол анализа:

1.96-луночные планшеты Costar покрывали 50 мкл / лунку коллагена I из хвоста крысы при 40 мкг / мл в течение 2 часов при 37 ° C, промывали 3 раза 200 мкл PBS и давали высохнуть в вытяжном шкафу для культивирования тканей.
2. Клетки HeLa, стабильно экспрессирующие основанный на FRET репортер инициаторной каспазы (ICRP), или производные клеточные линии, экспрессирующие дополнительные трансгены, где указано, высевали (2500 клеток в 100 мкл на лунку среды DMEM с 10% FBS). Использовали только центральные лунки каждого планшета, и 200 мкл среды добавляли во все окружающие лунки.Планшеты оставляли на 20 минут в вытяжном шкафу для культивирования тканей перед перемещением в инкубатор на 24 часа.
3. Клеточные среды обновляли средой без фенолового красного при подготовке к визуализации.
4. Клетки предварительно визуализировали в течение 30 минут перед добавлением лекарственного средства (в среде без фенолового красного).
5. Пертурбагены были добавлены в среду, как указано в наборе данных.
6. Клетки визуализировали каждые 5 минут в течение 24 часов с использованием роботизированного микроскопа PerkinElmer Operetta с камерой для живых клеток (при 37 ° C с 5% CO 2 ) с использованием 10-кратного объектива (NA = 0.4) и конфигурации фильтров для CFP (возбуждение: 425-450 нм / излучение: 460-500 нм) и CFP-YFP FRET (возбуждение: 425-450 нм / излучение: 520-560 нм). Для клеток, стабильно экспрессирующих интересующие белки, помеченные mCherry, и для клеток, стабильно экспрессирующих репортер митохондриального межмембранного пространства (IMS-RP, репортер MOMP), который использовался только для валидации методов (см. Пункт 11 ниже), одна дополнительная конфигурация фильтра ( Возбуждение: 550-600 нм / Эмиссия: 610-660 нм) использовали на протяжении всего эксперимента, когда присутствовал репортер MOMP, или в начале эксперимента, когда присутствовал интересующий белок, помеченный mCherry.
7. Сегментация изображения выполнялась следующим образом. Для вычитания фона изображения I raw были разбиты на 64 блока размером 170 на 128 пикселей. Отфильтрованное по Гауссу распределение интенсивности в каждом тайле использовалось в качестве меры локального фона для реконструкции фонового изображения с полным разрешением I bg путем билинейной интерполяции по режимам тайла. Учитывая нулевую среднюю интенсивность фона в I CFP = I CFP, raw — I CFP, bg , нижняя половина интенсивности фона была перенесена на верхнюю половину в распределении абсолютных интенсивностей | I CFP | , такой, что 20-й процентиль p 20 из | I | может использоваться как надежная оценка изменчивости фона.При пороговом значении t = 3 p 20 ложноположительные элементы маски в M t = (I CFP > t) были достаточно редкими, чтобы их можно было надежно подавить морфологической эрозией. Перед эрозией контактирующие клетки были разделены водоразделом I CFP после применения широкого фильтра Гаусса. Фильтр Гаусса был параметризован таким образом, что чрезмерная сегментация была редкостью. Комбинированная окончательная маска M для показаний одной ячейки была получена из пороговой маски M t и водоразделов W путем размывания M t ¬W.
8. Показания интенсивности в форме отношения FRET I CFP / I FRET были извлечены из каждой ячейки в каждом сегментированном кадре. Чтобы уменьшить влияние хроматической аберрации и межканального дрожания, изображение FRET с вычетом фона I FRET было выровнено с изображением CFP с вычетом фона I CFP с субпиксельным разрешением посредством билинейной интерполяции. Требуемый сдвиг определялся для каждого кадра квадратичной пиковой интерполяцией коэффициентов взаимной корреляции между I FRET и I CFP .Маска M, определенная из I CFP , применялась на ячейку как к I CFP , так и к выровненному I FRET , так что отношение FRET могло быть вычислено как медиана пиксельного отношения интенсивностей в области маски. . Из-за эрозии M t ¬W тонкие выступы ячеек с большей относительной ошибкой в ​​I FRET и I CFP были исключены из медианы пиксельных соотношений. В качестве меры уровня экспрессии представляющих интерес белков с меткой mCherry (FLIP-S / FLIP-L, Bcl-2 / Bcl-XL) 80 процентиль в области маски выровненного по фону выровненного изображения mCherry было использовано.
9. Отслеживание клеток выполняли следующим образом. В дополнение к показаниям интенсивности, для каждой ячейки i в каждом кадре f определяли центроид маски (x, y) i, f . Чтобы преодолеть межкадровое дрожание, были определены межкадровые сдвиги Δx и Δy путем кросс-корреляционного анализа последовательных изображений CFP, которые были подвергнуты субдискретизации в 4 раза. Эти сдвиги Δx и Δy применялись к центроидам (x, y) i, f для установления треков между кадрами f и f + 1. Ячейки i и j в двух последовательных кадрах f и f + 1 были соединены, если (x + Δx, y + Δy) i, f — ближайшая позиция к (x, y) j, f + 1 среди всех ( x + Δx, y + Δy) f и (x, y) j, f + 1 — ближайшая позиция к (x + Δx, y + Δy) i, f среди всех (x, y) ф + 1 .
10. Оценка времени гибели клеток была основана на изменениях в морфологии клеток или, когда репортер IMS-RP MOMP был коэкспрессирован, на его внутриклеточном распределении. Морфологическими переменными, показывающими округление ячеек, которые были извлечены для каждой ячейки в каждом кадре, были «площадь» маски с одной ячейкой и «краевой показатель», количественно определяющий контраст на границе ячейки: 4 линейных сканирования I CFP повернутых на 45 ° вокруг центра тяжести маски были отфильтрованы по Гауссу, и была определена медиана соответствующих 8 максимальных наклонов интенсивности в 3-пиксельной близости от границы маски.Расширенные ячейки дали неглубокие максимальные наклоны для этого считывания, тогда как округление ячеек привело к резкому увеличению наклона интенсивности на границе маски.
11. Чтобы подтвердить использование ICRP для классификации судеб, IMS-RP коэкспрессировали с ICRP-зондом FRET инициатора каспазы. Для обнаружения MOMP положение ядра оценивалось путем нахождения внутри одноклеточной маски положения пика интенсивности флуоресценции CFP после фильтрации I CFP с широким гауссовым углом. В этом подходе использовалось наблюдение, что ICRP не исключена из ядра и что эпифлуоресценция интегрируется в самом широком z-диапазоне в этом месте.При интактных наружных мембранах митохондрий IMS-RP исключен из ядерной области. После MOMP IMS-RP повсеместно распространяется внутри клетки, включая ядерную область. Резкие вариации всех этих трех переменных свидетельствовали либо о делении клеток, либо о апоптозе. Если клетки восстанавливали свои исходные значения в показателях границ и площади менее чем за 4 часа, событие классифицировалось как разделение; в противном случае это было классифицировано как апоптоз. Потеря отслеживания в течение этих 4 часов или неполное выздоровление рассматривались как подорванная судьба.Были проанализированы все клетки в полях зрения, и только некоторые были отброшены, если отслеживание было потеряно до конца эксперимента или до гибели клеток, или когда событие не было должным образом классифицировано как деление клетки или смерть клетки (см. Выше). . При таком строгом подходе корректировка пороговых значений для классификации судьбы не повлияла на результаты качественно.
12. Подход слежения был подтвержден двумя тестами. Во-первых, в условиях, когда IMS-RP коэкспрессировалась, соответствие между морфологической оценкой и вызовами, основанными исключительно на IMS-RP, составляло 80 ± 2%, а время MOMP имело корреляцию Пирсона r = 98.8 ± 0,4 в 4 условиях с разными дозами TRAIL. Во-вторых, среди клеток, которые были классифицированы как умирающие, мы обнаружили точку перегиба в соотношении FRET, которая указывает на внезапную активацию эффекторных каспаз. Чтобы точно определить это событие, мы отслеживали расхождение между конечной производной отношения FRET и производной отношения FRET после сглаживания более 7 кадров. Мы определили время MOMP как 4 кадра до того, как это расхождение превысило стандартное отклонение в два раза.
13.Подбор траектории проводили следующим образом: среднюю траекторию отношения FRET всех необработанных клеток вычитали из траектории отношения FRET каждой обработанной клетки. Затем шум в траекториях был отфильтрован с использованием функции MATLAB function filterfilt с размером окна, соответствующим 55 мин (11 кадров). Для каждой траектории из траектории вычиталось минимальное значение отношения FRET. Производная отношения FRET была вычислена с использованием конечных разностей и траекторий, отфильтрованных с использованием функции MATLAB filterfilt с размером окна, соответствующим 55 мин (11 кадров).
Подбираемая модель основана на уравнении:

Время максимального значения производной отношения FRET (τ) использовалось в качестве конечной точки для подгонки модели к соотношению FRET с использованием MATLAB fit . Параметр t 0 был ограничен диапазоном [–30 мин, τ — 30 мин] и от k до [0, 0,01] . В случаях, когда аппроксимация траектории была плохой (r² (FR (t) = cste) с p = 0,05 в качестве отсечки. В случаях, когда аппроксимация была ненамного лучше, чем у плоской модели, k было установите значение 10⁻⁷ (минимальное значение, наблюдаемое для посадки).Клетки, которые умерли рано (иногда менее чем за 70 минут) и чья траектория не могла соответствовать приведенному выше уравнению, были исключены из последующего анализа, исходя из предположения, что они представляют другие формы гибели или потери клеток.
14. Значение θ было определено путем минимизации функции ошибок:

где Θ — функция Хевисайда:
15. В двумерном ландшафте τ и k, вычисленных из траекторий отдельных ячеек, θ соответствует линии, определяемой как τ = θ / 2 k + t 0 .Линия разделяет клетки по судьбе, при этом выжившие клетки падают слева от границы судеб (низкий k и / или короткий τ), а мертвые клетки — справа от границы (более высокий k и / или более длинный τ). Точность границы оценивалась для всех экспериментов на основе среднего значения θ T = 2,63 × 10⁻ & sup3, обученного на данных с дозами TRAIL, равными и выше 10 нг / мл.

Ограниченная серия OCTAVIA-10 (веерный лад)

Доступная уже сейчас, 10-струнная веерная ладовая гитара Octavia с красивым верхом из клена Spalted, изогнутым шнуром Lace X-Bar 5.0 звукоснимателей, шкала длины 32/28 дюймов (многомасштабная), гриф и гриф из клена, а также 24 лада. Эти 10-струнные гитары были выпущены ограниченным тиражом очень ограниченным тиражом. Как только они ушли, они ушли!

Полные характеристики и фотографии этой удивительной 10-струнной гитары ниже:


Halo Octavia 10-струнная гитара, веерный лад


Halo Octavia 10-струнная гитара, веерный лад


Halo Octavia 10-струнная гитара, веерный лад


Halo Octavia 10-струнная гитара, веерный лад

  • ОБЩИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
  • Ловкость: правая рука
  • Метод конструкции: на болтах
  • Строки: 10
  • Тюнинг: G #.C # .F # .B.E.A.D.G.B.E
  • Диапазон длин: 32–28 дюймов (Мультимасштаб, «веерный лад»)
  • ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КУЗОВА
  • Форма корпуса: OCTAVIA
  • Контур: конические края
  • Дерево / Материал: красное дерево со шпоном кленовой поверхности (шпон)
  • Отделка корпуса (верх): Естественный блеск
  • Отделка корпуса (стороны / задняя часть): прозрачный черный глянец
  • Переплет: Черный
  • ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ШЕИ
  • Форма передней бабки: 5×5
  • Дерево / Материал: Клен
  • Накладка на гриф: клен
  • Отделка передней бабки: Match Body (натуральный блеск)
  • Отделка грифа: прозрачный черный глянец
  • Лады / Размер: 24, Jumbo, Нейзильбер
  • Инкрустация: черные точки по бокам
  • Переплет передней бабки: черный
  • Переплет на гриф: черный
  • Гайка: Graphtech Black TUSQ XL
  • КОМПОНЕНТЫ
  • Цвет фурнитуры: Черный
  • Мостовидная система

  • : односедельная мостиковая система Halo
  • Тюнеры: Halo, Standard
  • Звукосниматели: Lace X-Bar 5.0
  • Шаблон управления: 1 переключатель громкости, 1 тембр и 3-позиционный переключатель звукоснимателей
  • Ручки: металл, купол

Разница между 12- и 14-ладами акустических гитар

Различия между этими двумя типами гитар.

Математически разница между грифом акустической гитары с 12 ладами и грифом с 14 ладами может составлять всего два, но когда речь идет о звуке и ощущениях, это идет дальше.

Но прежде всего, что делает 12- vs.14-ладная гитара в смысле?

Это относится к положению, в котором гриф встречается с корпусом гитары. Итак, на 12-ладовой гитаре гриф касается корпуса на 12-м ладу, а на 14-ладовой гитаре — на 14-м ладу.

У Fender Paramount PM-2 Parlor может похвастаться грифом на 12 ладов (всего 19 ладов на грифе), в то время как CN-60S имеет 18 ладов, но встречается с грифом на 12 ладу.

Почти каждая вторая акустика Fender имеет 14 ладов вне корпуса, включая все, кроме Parlor из серии Paramount.

Большая разница между гитарой на 12 и 14 ладов заключается в расположении бриджа.

У 12-ладовой гитары мост расположен дальше от звукового отверстия, ближе к нижней части, что позволяет ей располагаться на более гибком месте наверху и обеспечивает больший сустейн для небольших корпусов.

«12-ладовый мост уходит глубже в корпус гитары, — сказал вице-президент Fender Acoustics по разработке продуктов Брайан Свердфегер. «Это самая широкая часть нижней части схватки.Гитары на 12 ладов обычно имеют более теплое и полное звучание из-за того, где расположен бридж ».

С другой стороны, гитара с 14 ладами, с мостом ближе к звуковому отверстию, может быть ярче, с большей атакой на высоких частотах.
Комфорт — еще одно отличие этих двух гитар. Игроки с более компактным корпусом могли бы приблизить корпус 12-ладного инструмента к себе.

«Когда вы погружаете шею в тело, у вас меньше досягаемости», — сказал Свердфегер.«Таким образом, для людей с меньшим телосложением гриф на 12 ладов может быть более удобным, потому что вы не доходите до шеи так глубоко.

«Тем, кому комфортнее, играть легко. Но человеку, который традиционно играет на 14-ладовой гитаре, может быть тесно. Если у тех людей, которые играют на седьмом или восьмом ладу, их локоть может попасть в их тело ».

В конце концов, это вопрос личных предпочтений. Тон, стиль и комфорт — все это определяет, подходит ли вам гитара.И вы поймете это, только сыграв их обоих.

Серия

Collings 000 | 12-ладная акустическая гитара

Переключить навигацию

  • Инструменты
    • Акустические гитары
      • Рекомендуемые
      • T-серия
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Модели
        • Особенности
        • Наши гитары традиционной серии или «T-серии» представляют собой захватывающую винтажную тональную вариацию отличительного звука Коллингса, разработанную и созданную для демонстрации наиболее желаемых характеристик, присущих желанным довоенным инструментам.
      • 14-ладовые модели
      • D серии
        • Модели
        • D1
        • D1 T
        • D2H
        • D2H T
        • D3
        • Наш классический 14-ладовый дредноут доступен в различных породах дерева и различных уровнях назначения.
      • CW серии
        • Модели
        • CW Mh
        • CW Индийский
        • Дредноуты серии

        • CW рассчитаны на максимальную мощность и объем. Они имеют верхнюю часть и распорки Adirondack, без язычковой скобы и увеличенные звуковые отверстия.
      • OM серии
      • 00 14-Fret Series новые
      • 0 серии
        • Модели
        • 01
        • 01 Т
        • 02H
        • 02H T
        • 03
        • Популярная серия 0 отличается длиной шкалы 24 7/8 дюйма и компактными размерами корпуса, обеспечивающими впечатляющую четкость и скорость отклика.
      • Детские серии
        • Модели
        • Детские 1
        • Детские 2H
        • Baby 3 (Скоро в продаже)
        • Серия Baby — наша самая миниатюрная гитара с удобной шкалой длиной 24 1/8 дюйма.Идеально подходит для путешествий, Baby — отличный инструмент для сочинения песен.
      • CJ серии
        • Модели
        • CJ
        • CJ Mh
        • КДЖ-35
        • CJ-45 Новый
        • Серия CJ предлагает разнообразные конструкции распорок, выбор дерева и звуки, все в контексте этой классической формы дредноута на склоне плеча.
      • SJ серии
        • Модели
        • SJ
        • SJ Индийский
        • SJ Mh
        • Узкая талия и широкая нижняя часть нашего небольшого гигантского корпуса обеспечивают артикулированные басы с усиленным звучанием в средних и высоких частотах.Это приводит к отличному общему тональному балансу.
      • C100 серии
        • Модели
        • C100
        • C100 Deluxe
        • Новая серия C100 сочетает в себе стильные пропорции в стиле салона с мощью и громкостью инструмента с большим корпусом.
      • C10 серии
        • Модели
        • C10
        • C10 Deluxe
        • C10-35
        • Превосходная тональная фокусировка компактного корпуса гитарной гитары в сочетании с удобным грифом в форме буквы «C» делает C10 популярным и универсальным выбором для многих стилей игры.
      • 12-ладовые модели
      • DS серии
        • Модели
        • DS1
        • DS2H
        • DS3
        • Эта форма дредноута с наклонным плечом на 12 ладов зародилась в гитарах раннего гавианского стиля, но плавность и теплоту звука этой конфигурации сделали ее популярной среди многих музыкантов.
      • 000 серий
        • Модели
        • 0001
        • 0002H
        • 0003
        • Collings 000 идеален для любого гитариста, который хочет получить максимум мощности от инструмента удобного размера с элегантным старинным внешним видом.
      • 00 серии
        • Модели
        • 001
        • 001 T новые
        • 002H
        • 002H T новый
        • 003
        • Этот удобный размер 00 с тонкой артикуляцией, впервые разработанный во времена Гражданской войны, дополнен широкой шейкой и короткой струнной шкалой 24 7/8 дюйма для удобства игры.
      • 0 12-ладовая серия
      • 0 12-струнная серия
        • Модели
        • 01 12-струнный
        • 02H 12-струнный
        • 03 12-струнный
        • В этой 12-струнной системе используется шкала длиной 24 7/8 дюйма и теплая артикуляция нашего нулевого стиля корпуса для четкого и мощного 12-струнного звука.
      • Серия доильных залов
        • Модели
        • Прихожая 1 т
        • Прихожая 2H T
        • Вдохновленная некоторыми из самых ранних гитар со стальными струнами, миниатюрная серия Parlor обеспечивает исключительный баланс и отзывчивость.
      • Другие модели
      • Баритон серии
    • Электрогитары
      • Цельный корпус
      • 290 серии
        • Модели
        • 290
        • 290 ю.ш.
        • 290 постоянного тока
        • 290 DC S
        • Целиком из красного дерева 290 доступен в различных моделях, каждая из которых извлекает выгоду из различных сильных сторон этой простой, но универсальной конфигурации.
      • серии 360
      • CL серии
        • Модели
        • CL
        • CL Делюкс
        • Созданные для исключительной сложности звука и сустейна, гладкие очертания City Limits — это новый уникальный взгляд на эту классическую конфигурацию с одним вырезом.
      • Полуполый
      • I-35 серии
      • Серия

      • SoCo
        • Модели
        • SoCo LC
        • SoCo LC Делюкс
        • SoCo Deluxe
        • Серия SoCo сочетает в себе некоторые из самых любимых функций и звуков из наследия полуполых гитар с неповторимым внешним видом и ощущениями.
      • SoCo серии 16
        • Модели
        • SoCo 16 LC
        • SoCo 16 LC Делюкс
        • Наши полуполые модели SoCo 16 LC обладают всеми преимуществами и универсальностью наших меньших 15-дюймовых предложений SoCo, но с полным 16-дюймовым нижним выступом для более сильного отклика на низких частотах.
      • Полностью полый
      • 470 Series новые
        • Модели
        • 470 JL
        • Благодаря звукоснимателям Рона Эллиса Эллисона, тщательно подобранным компонентам и уникальной конструкции эстакады, 470 JL обеспечивает доступ к неизведанным уровням экспрессии и динамическому диапазону для гитаристов, которые не знают границ.
      • I-30 серии
        • Модели
        • И-30 LC
        • Козел I-30 LC поднимает концепцию полностью полой гитары с двойным вырезом, оснащенной P90, на новый уровень.
      • Eastside серии
      • Серия

      • Statesman
        • Модели
        • Государственный деятель LC
        • Государственный деятель LC Делюкс
        • Эта полностью полая тонкая конструкция отличается живым акустическим откликом и невероятно легким весом.Тонально он подходит для самых разных стилей от джаза до рокабилли.
      • CL Jazz серии
        • Модели
        • CL Джаз
        • City Limits Jazz — это полностью оборудованная джазовая арка из цельного дерева. Благодаря тонкой глубине корпуса и плавающему звукоснимателю Lollar CL Jazz обладает исключительной тональной фокусировкой и акустическим откликом.
    • Гитары Archtop
      • Модели
      • В 16
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Подобно ранним американским арктопам 1920-х годов, ограниченная серия AT 16 разработана для исключительной отзывчивости и предназначена для игры на акустической гитаре.
      • AT 16 Делюкс
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Полностью обшитая декоративной отделкой и S-образными звуковыми отверстиями, ограниченная серия AT16 Deluxe представляет собой современный стильный полностью акустический арочный дизайн.
      • В 17
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Лимитированная серия AT 17 представляет собой вершину мастерства Collings и тона арктопа.
    • Мандолины
      • Стиль А
      • МТ
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • В то время как MT — наша самая доступная и простая в использовании мандолина в стиле А, ее качество конструкции и играбельность не уступают любой предлагаемой нами мандолине.
      • MT O
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Эта вариация доступной по цене и простой конструкции MT с овальным отверстием отличается теплой открытой тональностью, более широким гайком и более коротким грифом.
      • MT2
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • MT2 — это наша полностью оборудованная мандолина в стиле А. Глянцевое покрытие нитроцеллюлозным лаком и верхняя часть Adirondack придают исключительную живость и тон.
      • MT2 O
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Эта вариация нашего полностью оборудованного MT2 с овальным отверстием представляет собой теплую открытую тональность с более широким порожком и более коротким грифом.
      • МТ2 В
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • MT2 V включает в себя тонкий и акустически отзывчивый алкидный лак для исключительного тона и теплую патину в винтажном стиле.
      • MT Мандола
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Наша сатинированная MT Mandola сочетает в себе звук профессионального уровня и удобство игры с элегантным сдержанным оформлением.
      • MT2 Мандола
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Наша полностью оборудованная Мандола MT2 имеет глянцевое покрытие нитроцеллюлозным лаком и верхнюю часть из отборной ели Адирондак для превосходного тона и улучшенной четкости нот.
      • F-стиль
      • MF
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Несмотря на то, что MF — наша самая доступная и простая в использовании мандолина в стиле F, ее качество конструкции и играбельность не уступают любой предлагаемой нами мандолине.
      • MF O
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Эта вариация нашего доступного по цене и просто оформленного MF с овальным отверстием отличается теплой открытой тональностью, более широким порожком и более коротким грифом.
      • MF Deluxe
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • MF Deluxe предлагает некоторые из наших лучших решений и функций, такие как накладная накладка из черного дерева на нашей самой доступной модели F-стиля.
      • MF5
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • MF5 — наша полностью оборудованная мандолина в стиле F. Глянцевое покрытие нитроцеллюлозным лаком и верхняя часть Adirondack придают исключительную живость и тон.
      • MF5 O
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • Эта вариация нашего полностью оборудованного MT2 с овальным отверстием представляет собой теплую открытую тональность с более широким порожком и более коротким грифом.
      • MF5 В
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • MF5 V включает в себя тонкий и акустически отзывчивый алкидный лак для исключительного тона и теплую патину в винтажном стиле.
      • MF5 Делюкс V
        • Исследуйте
        • Обзор
        • Особенности
        • Галерея
        • MF5 Deluxe V олицетворяет вершину мастерства и звучания Collings. Это наша флагманская мандолина с инкрустацией ручной гравировки и выгравированным тайпиком.
    • Гитары Ватерлоо